【摘 要】
：
[目的]丙戊酸(Valproic Acid,VPA)是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂,目前临床上用于癫痫病的治疗.本研究将探讨VPA在治疗癫痫病的血药安全剂量(0.5mM)和临界安全剂量(1mM)下对乳腺癌细胞MCF7放射增敏作用,以及VPA对修复DNA双链断裂的同源重组(HR)和非同源重组(NHEJ)分子机制的影响.[方法]将MCF7细胞分为对照、单独VPA、单独电离辐射(Ionizing Radi
【机 构】
：
山东大学公共卫生学院劳动卫生与职业病学系,济南
【出 处】
：
中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]丙戊酸(Valproic Acid,VPA)是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂,目前临床上用于癫痫病的治疗.本研究将探讨VPA在治疗癫痫病的血药安全剂量(0.5mM)和临界安全剂量(1mM)下对乳腺癌细胞MCF7放射增敏作用,以及VPA对修复DNA双链断裂的同源重组(HR)和非同源重组(NHEJ)分子机制的影响.[方法]将MCF7细胞分为对照、单独VPA、单独电离辐射(Ionizing Radiation,IR)和VPA+IR联合四组,进行以下实验研究：VPA预处理MCF7细胞0、24、48和72h,给予8Gy的IR后恢复6h,通过免疫印迹和免疫荧光方法观察各组DNA双链断裂标志物γ-H2AX、HR相关蛋白Rad51和BRCA1及NHEJ相关蛋白KU80的表达和焦点形成；取对数生长期的MCF7细胞用VPA预处理72h,给予4Gy的IR后48h,用MTT法检测细胞存活率；VPA预处理24h的MCF7细胞分别给予2、4和6Gy照射,观察细胞克隆形成率；通过带有表达重组底物pDR-GFP的MCF7和EJ5-GFP的U2OS细胞系测定HR和NHEJ的重组效率；VPA处理MCF7和U2OS细胞后,用流氏细胞仪检测细胞周期.[结果]单独VPA 0.5和1mM处理细胞后,γ-H2AX蛋白表达和焦点形成量呈增加趋势,VPA预处理的细胞能使IR诱导的γ-H2AX蛋白表达和B型焦点(代表DNA损伤严重的一类焦点形态)形成量显著增加(P＜0.01),提示VPA可造成乳腺癌细胞内DNA双链断裂的蓄积.MTT与细胞克隆形成结果均显示,VPA单独处理细胞后,与对照组相比均可显著降低细胞存活率(P＜0.01)；与单独照射处理组相比,VPA预处理后还能显著地降低IR所致的细胞存活率和克隆形成率(P＜0.01),揭示VPA诱导的DNA双链断裂蓄积与增强细胞对放射敏感性有关.进一步研究还发现,安全和临界安全剂量的VPA处理MCF7细胞后,HR效率分别降低了42.59％和37.58％(P＜0.01),NHEJ效率分别降低60.89％和53.77％(P＜0.01)；同时,VPA处理的MCF7和U2OS细胞,其细胞周期的各时相比例均未发生显著性变化,意味着VPA所致的放射增敏作用与HR和NHEJ机制破坏有关,与细胞周期无关.此外,VPA单独处理细胞后,HR相关蛋白Rad51、BRCA1和NHEJ相关蛋白KU80活性呈降低趋势；VPA预处理后再给予8GyIR,与单独IR组相比,Rad51、BRCA1和KU80活性下降更加明显(P＜0.01).[结论]安全和临界安全剂量VPA不仅对乳腺癌细胞生长具有抑制作用,还能增强细胞对放射的敏感性,抑制BRCA1-Rad51介导的HR和KU80介导的NHEJ修复功能是安全剂量VPA致放射增敏作用的关键分子机制.
其他文献
目的:探讨早期使用GCS在预防老年髋部骨折术后DVT形成中的影响.方法:随机选取72例老年髋部骨折术后患者,分为研究组和对照组,男女不限,各36例.两组均予髋部骨折术后常规护理,术后24h予低分子肝素钠0.4ml,皮下注射,Qd抗凝治疗;研究组术后麻醉清醒即使用GCS;对照组于术后72h引流管拔除后使用GCS.两组均于术后第7天行双下肢血管彩色多普勒超声检查,观察DVT发生情况.结果:研究组1例患
目的:探讨循环护理模式在预防老年患者髋关节置换术后并发症中的应用效果.方法:选取2013年6月-2014年12月在我院因股骨颈骨折行髋关节置换手术治疗的102例老年患者为研究对象,随机分成常规护理组和循环护理2组,每组各51例,常规护理组采取常规护理模式进行护理,循环护理组在此基础上采用循环护理模式对患者进行干预,将两组患者术后压疮、坠积性肺炎和下肢深静脉血栓形成的发生率进行统计及比较.结果:循环
目的:探讨经皮椎弓根螺钉固定,微创后路腰椎体间融合术的的围手术期护理措施.方法:对73例实施经皮椎弓根螺钉固定微创后路腰椎体间融合术的患者结合手术特点进行了术前、术后护理及并发症的预防.讨论:经皮椎弓根螺钉固定,微创后路腰椎体间融合术具有创伤小、安全性高和疗效满意的优点,精心的围术期护理对保证手术成功及促进患者康复具有重要意义.
目的:探讨经皮椎体成形术(Percutaneous vertebroplasty;PVP)及后凸成形术(Percutaneous kyphoplasty;PKP)的长期临床治疗效果.方法:72例诊断为骨质疏松性椎体压缩性骨折的老年患者(＞60岁)被纳为研究对象,接受PVP手术的32例为PVP组,而接受PKP手术的40例为PKP组.使用疼痛视觉评估表(Visual analog scale VAS)
目的:探讨密固达(唑来膦酸)联合椎体后凸成形术治疗骨质疏松性椎体骨折的临床疗效.方法:回顾性分析2010年6月至2012年12月我院行PKP手术的骨质疏松性椎体骨折患者48例,根据术后是否应用密固达治疗分为对照组和实验组.所有患者于治疗前和治疗1年后行骨密度测量及VAS疼痛评分,评价治疗效果.
目的:探讨分析ROI-C在颈椎前路手术中的手术治疗方法及疗效.方法:2013年04月～2014年12月,我们在颈椎前路手术中应用ROI-C进行前路减压融合内固定手术45例,融合器中均植入骨诱导促进椎间融合.其中脊髓型颈椎病34例,神经根型颈椎病3例,颈髓过伸伤3例,颈椎间盘突出2例,颈椎不稳2例,节段性颈椎后纵韧带骨化1例,术后JOA及NDI评分较术前明显增加,神经症状及功能改善明显.
目的:N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)为体内谷胱甘肽的前体,具有调节体内多种细胞分化,增强生物材料表面组织再生以及抗氧化等作用.本实验拟考察在磷酸钙-丝素蛋白骨水泥中复合NAC后的理化特性、力学性能及生物相容性.方法:将含有不同浓度NAC (0、10、25、50 mM)的丝素蛋白溶液与α-磷酸三钙按固液比1∶0.4的比例混合,在37 ℃下固化72小时后,利用XRD检测各
[目的]通过食蟹猴的6个月喂养试验,研究转Cry1Ab/Ac大米对非人灵长类动物的免疫系统的影响以及对Bt蛋白在非灵长类动物体内的代谢情况进行初步探讨,为转Cry1Ab/Ac大米的风险评估提供参考.[方法]以转Cry1Ab/Ac大米为受试物,选用2～4岁的食蟹猴32只.将动物随机分为6组：普通大米照组8只(含TDAR-普通大米对照组2只)、Bt大米低剂量组8只、Bt大米高剂量组12只(含TDAR-
毒理学动物试验是化学物危害识别的主要手段,为人类的健康做出了重要的贡献,早在1978年,美国就实施了国家毒理学计划(NTP),30多年来,国家毒理学计划已经发表了数百篇研究报告,其研究数据具有重要的公共卫生意义,管理机构可据此对特定化学物质进行监管,从而保护公众健康.此外,NTP建立的和/或验证过的试验体系作为标准被广泛采用,有力地促进了毒理学科的发展.然而,随着越来越多的化学物质进入人类的生活环
"GRAS" is an acronym for the phrase Generally Recognized As Safe.In the United States (U.S.), a food ingredient typically must either be the subject of a food additive regulation that is approved by F