【摘 要】
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[目的]通过食蟹猴的6个月喂养试验,研究转Cry1Ab/Ac大米对非人灵长类动物的免疫系统的影响以及对Bt蛋白在非灵长类动物体内的代谢情况进行初步探讨,为转Cry1Ab/Ac大米的风险评估提供参考.[方法]以转Cry1Ab/Ac大米为受试物,选用2～4岁的食蟹猴32只.将动物随机分为6组：普通大米照组8只(含TDAR-普通大米对照组2只)、Bt大米低剂量组8只、Bt大米高剂量组12只(含TDAR-
【机 构】
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中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心,北京;中山大学药学院,广州 中国食品药品检定研究院
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
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[目的]通过食蟹猴的6个月喂养试验,研究转Cry1Ab/Ac大米对非人灵长类动物的免疫系统的影响以及对Bt蛋白在非灵长类动物体内的代谢情况进行初步探讨,为转Cry1Ab/Ac大米的风险评估提供参考.[方法]以转Cry1Ab/Ac大米为受试物,选用2～4岁的食蟹猴32只.将动物随机分为6组：普通大米照组8只(含TDAR-普通大米对照组2只)、Bt大米低剂量组8只、Bt大米高剂量组12只(含TDAR-Bt大米高剂量组4只)、环磷酰胺阳性对照组4只.每组动物雌雄各半,饲喂添加大米的猴饲料,其中阴性对照组和阳性对照组均给予普通大米饲料；低、高剂量组分别喂食含17.5％、70％转Cry1Ab/1Ac大米饲料；阳性对照组在实验结束前1周静脉注射环磷酰胺20mg/kg,隔天1次,给药4次.猴饲料每天饲喂2次,每次100-±10g,持续饲喂6个月,并设4周恢复期.实验期间每天进行临床症状观察和摄食量检测,每周进行体重称量.饲喂第0、1、3、6月和恢复期结束分别进行体温、心电图、血液学、血清生化、尿生化、血清Th1/Th2型细胞因子、外周血淋巴细胞增殖功能检测以及外周血T、B、NK淋巴细胞亚群的测定；实验期结束和恢复期结束,进行T细胞依赖性抗体反应(T cell-dependent antibody response,TDAR)、脾细胞增殖功能、脏器称重以及组织病理学检查.此外,利用Agdia Bt-Cry1Ab/1Ac ELISA试剂盒定量检测饲喂前、首次饲喂、饲喂3个月和6个月时的血清、尿液和粪便中的Bt蛋白含量,以及解剖后采集的胆汁、肠内容物和各脏器组织中的Bt蛋白分布.[结果]在6个月的喂养试验中,除个别动物出现脱毛,各组动物临床症状未见明显异常,体重稳步增长.统计学分析结果显示：与普通大米对照组相比,Bt大米组的体重、摄食量、心电图、血液学、外周血淋巴细胞亚群、外周血淋巴细胞增殖率、脾细胞增殖率、TDAR以及脏器重量和系数等指标均未见统计学差异,组织病理学结果也未见异常,仅体温、血清生化、细胞因子等个别指标出现统计学差异.由于这些有差异的指标均在正常范围内,且无时间和剂量相关性,可认为这些指标的变化不具有毒理学意义,饲喂转Bt基因大米对食蟹猴的体温、血清生化、细胞因子无明显影响.给予环磷酰胺后,阳性对照组动物出现明显的免疫抑制,WBC、NEUT、LYMPH、＃Retie、％Retie和细胞毒型T细胞比例明显低于普通大米对照组(p≤0.05),胸腺和脾脏镜检可见淋巴细胞数目减少.在代谢研究方面,首次饲喂后,未在血液、尿液、胆汁和各脏器组织匀浆液中检测到Bt蛋白.在Bt大米低剂量组和高剂量组的动物粪便中均检测到Bt蛋白,其中Bt大米低剂量组与高剂量组在首次饲喂后、饲喂3个月和6个月时的粪便Bt蛋白含量出现明显的剂量相关性.在饲喂结束解剖取得的肠内容物中也检测到Bt蛋白；然而,经历一个月的恢复期后,并未在肠内容物中检测到Bt蛋白的存在.[结论]饲喂转Cry1Ab/Ac大米6个月后,食蟹猴的一般毒性和免疫毒性指标未见与转基因大米作用相关的的变化,未发现饲喂转CG1Ab/Ac大米对食蟹猴有免疫毒性.而转Cry1Ab/1Ac大米中的Bt蛋白在食蟹猴血液和各脏器组织中并无分布,且经胃肠道消化降解后以粪便途径排泄,尚无证据表明Bt蛋白能在动物体内蓄积.
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