【摘 要】
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目的 本研究采用RNA干扰技术探讨白血病HL-60细胞株RYBP基因沉默后对化疗药物敏感性的影响.方法 构建针对RYBP基因的shRNA干扰质粒并建立稳定沉默RYBP基因的白血病细胞株
【出 处】
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广东省医学会第十九次血液病学学术会议
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目的 本研究采用RNA干扰技术探讨白血病HL-60细胞株RYBP基因沉默后对化疗药物敏感性的影响.方法 构建针对RYBP基因的shRNA干扰质粒并建立稳定沉默RYBP基因的白血病细胞株HL-60,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测确认RYBP基因在mRNA和蛋白水平的沉默效果.然后用DNA ladder及Annexin V标记的流式细胞术检测各组HL-60细胞凋亡的情况,用CCK-8法检测各组HL-60细胞的增殖情况及对化疗药物阿糖胞苷和柔红霉素的敏感性.结果 成功构建的RYBPshRNA慢病毒载体能够在mRNA和蛋白水平有效沉默白血病细胞株HL-60中RYBP基因的表达.在没有加入化疗药物时,RYBP shRNA组凋亡率低于空载体对照组(NC组)(p＜0.05),且细胞活性较NC组明显增高；用阿糖胞苷处理时,RYBP shRNA组凋亡率和抑制率均低于NC组(p＜0.05)；用柔红霉素处理时,RYBP shRNA组凋亡率虽然低于NC组,但是抑制率差异不明显.结论 RYBP基因沉默能抑制HL-60细胞细胞的凋亡,且明显降低其对阿糖胞苷的敏感性,但是RYBP基因沉默后HL-60细胞对柔红霉素的敏感性无显著变化.提示白血病细胞高表达RYBP基因可能是一个保护性的因素,能促进细胞的凋亡及增强对化疗药物的敏感性.
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