【摘 要】
：
目的 利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立LSD1基因稳定干扰的HL-60白血病细胞系,观察下调LSD1表达对HL-60白血病细胞增殖、周期和凋亡的影响.方法 人工合成shLSD1基因干扰
【出 处】
：
广东省医学会第十九次血液病学学术会议
论文部分内容阅读
目的 利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立LSD1基因稳定干扰的HL-60白血病细胞系,观察下调LSD1表达对HL-60白血病细胞增殖、周期和凋亡的影响.方法 人工合成shLSD1基因干扰序列,构建LSD1 shRNA慢病毒重组载体,包装,收获、浓缩病毒,测定慢病毒滴度,将shLSD1慢病毒感染HL-60细胞,观察GFP表达,用Puromycin筛选HL-60 shLSD1稳定干扰细胞系,采用Real-time Quantitative PCR和Western blot方法验证干扰效果,用细胞计数法测定细胞的增殖,用流式细胞术测定细胞的周期和凋亡.结果 shLSD1稳定干扰的HL-60细胞系在倒置显微镜下呈绿色荧光,与HL-60 NC(阴性对照组)相比,HL-60 shLSD1(干扰组)的LSD1 mRNA下降了3.8倍,LSD1蛋白表达量明显减少,HL-60 shLSD1细胞生长速率减慢(P＜0.01),细胞周期G1期升高(P＜0.01),S及G2期减少(P＜0.01),细胞凋亡比例提高(P＜0.01).结论 成功建立了HL-60 shLSD1稳定干扰细胞系,LSD1表达的下调使HL-60白血病细胞增殖受抑,细胞周期阻滞在G1期,细胞凋亡增加.
其他文献
目的 γ δ T细胞具有抗肿瘤的潜能，在白血病过继性免疫治疗中可能有较好的应用前景.我们的前期研究已发现急性髓性白血病(AML)患者外周血 γ δ T细胞出现部分T细胞受体
目的 探讨长链非编码RNA PVT1(IncRNA-PVT1)对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4增殖的影响及其相关分子机制.方法 通过实时定量PCR(qRT-PCR)的方法检测APL患者和健康
目的 急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)是T细胞异常克隆性增殖形成而恶性程度高和预后较差的血液肿瘤.T-ALL患者中T细胞免疫功能及其TCR信号分子异常,A20(肿瘤坏死因子α诱导
目的 急性T细胞白血病(T-acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一类生物学特征异质性非常大的疾病,南T系前体细胞发生恶性转化致使造血系统病变的恶性肿瘤.临床应用标
目的 异基因造血干细胞移植作为治疗血液系统良、恶性疾病有效方法，在临床推广使用，而粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)是重要的干细胞动员剂，也是免疫调节剂。本课题目的在于研
目的 免疫性血小板减少症(ITP)是一种自身免疫性出血性疾病,T细胞免疫调控在ITP的发生发展中起重要的作用.我们前期研究发现ITP中存在异常的TCR亚家族克隆增殖和TCR信号
背景 临床和实验室的证据表明T细胞免疫紊乱在骨髓增生异常综合症(myelodysplastic syndrome,MDS)的发病和疾病进展中起重要作用,γ δ T细胞是表达TCR γ δ-CD3复合物
背景 慢性移植物抗宿主病(cGVHD)是异基因造血干细胞移植长期存活患者的主要并发症，现有免疫抑制治疗多以抑制T细胞活化为主要出发点，但是存在白血病等复发、致命性感染、
目的 探讨Disulfiram联合Cu(DS/Cu)诱导急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)细胞凋亡及其相关分子机制.方法 磁珠筛选CD34+CD38的KG1α细胞作为AML干细胞,
目的 研究Disulfirum(DS)联合Cu(DS/Cu)对B淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞株(nalm6细胞)增殖及凋亡的影响及其机制的探讨.方法 CCK8法检测不同浓度DS/Cu对Nalm6的增殖抑制作