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目的 探讨Disulfiram联合Cu(DS/Cu)诱导急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)细胞凋亡及其相关分子机制.方法 磁珠筛选CD34+CD38的KG1α细胞作为AML干细胞,流式细胞术检测空白对照组、DS单药组(5μmol/L)、DS/Cu组(5μmol/L/0.5 μ mol/L)、DS/Cu+NAC组(5μmol/L/0.5μmol/L/10mmol/L)的AML干细胞24h后凋亡比率及ROS水平；qRT-PCR检测上述各组TNF-α、CD40、TNFRSF 11B、TNFRSF1B、HRK凋亡相关基因mRNA表达水平；Western blot检测各组处理后TNF-α的蛋白表达水平；予以中和抗体TNF-αmAb(2μ g/mL)和对照抗体IgG(2μg/mL)预处理2h后,流式细胞术检测空白对照组、DS/Cu组、TNF-α mAb组、TNF-α mAb+DS/Cu组、IgG组及IgG+DS/Cu组的AML干细胞24h后的ROS水平.结果 予以DS或DS/Cu处理CD34+CD38-KG1α细胞后,细胞凋亡率由空白对照组的(6.65±0.64)％分别上升至(11.87±1.30)％、(27.43±1.65)％,差异均具有显著性统计学意义(P=0.008和P=0.001)；CD34+CD38-KG1α细胞ROS也分别上升了(1.39±0.115)倍和(2.81±0.109)倍,差异也具有统计学意义(P=0.028和P=-0.001),并且DS/Cu组比DS组更明显(P＜0.001)；应用NAC抑制DS/Cu诱导ROS蓄积后,细胞凋亡率由(27.43±1.65)％下降到(12.37±0.85)％(P=0.001).qRT-PCR结果显示DS及DS/Cu均上调TNF-α、CD40、TNFRSF1B、TNFRSF11B、HRK凋亡相关基因的mRNA水平(P＜0.05),且DS/Cu组较DS组上调的更明显(P＜0.05),但是予以NAC预处理2h后,仅TNF-α基因水平依然高表达(P=0.726),而CD40、TNFRSF 11B、TNFRSF1B、HRK基因水平均明显下调(P＜0.05).为进一步证实TNF-α作用,分别予以TNF-αmAb(2μg/mL)或IgG(2μ g/mL)预处理2h后,TNF-α mAb+DS/Cu组相比DS/Cu组的ROS变化率由2.78±0.25倍下降到1.28±0.17倍(P＜0.001),而IgG+DS/Cu组相比DS/Cu组的ROS变化率无显著性差异(P=0.23),TNF-α mAb及IgG组相比空白对照组的ROS水平无显著性差异(P=0.09和P=0.50).结论 DS/Cu可通过上调TNFα表达及蓄积ROS诱导AML干细胞凋亡.