【摘 要】
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[目的]喹乙醇是一种化学合成的抗菌促生长剂,属于喹噁啉类,作为兽药和饲料添加剂广泛使用于畜禽及水产养殖,本实验室的动物试验已发现喹乙醇具有肝肾毒性,用HK-2(人肾近
【机 构】
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浙江省医学科学院卫生学研究所,杭州310013
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
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[目的]喹乙醇是一种化学合成的抗菌促生长剂,属于喹噁啉类,作为兽药和饲料添加剂广泛使用于畜禽及水产养殖,本实验室的动物试验已发现喹乙醇具有肝肾毒性,用HK-2(人肾近曲小管上皮细胞)细胞替代动物试验进行毒性研究,为该药的安全性评价提供更有针对性的毒性依据.[材料和方法]喹乙醇标准品(含量≥98％)购自上海抚生实业有限公司；DMEM购自Gibco公司；新生小牛血清购自Hyclone公司；噻唑兰、青霉素、链霉素、均购自美国sigma公司；FITC Annexin V A poptosis Decection Kit Ⅰ购于BD公司；不同浓度的喹乙醇(终浓度为78.125、156.25、312.5、625、1250、2500、5000 μ g/mL)分别对HK-2细胞染毒24h和48h,采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]比色法测定细胞活力抑制率,DG3022A型酶联免疫检测仪测定每孔吸光度值,计算各剂量组的细胞抑制率,改良寇式法计算IC50.流式细胞术检测喹乙醇致HK-2细胞凋亡,测定仪器为FACSCalibur型流式细胞仪,分析软件为CellQuest versio 3.3. [结果]MTT结果显示, 喹乙醇对HK-2细胞24h染毒的IC50为324μg/ml,48h染毒的IC50为213μg/ml,形态学观察表明,喹乙醇染毒后HK-2细胞收缩变圆、脱壁；流式细胞检测结果显示,在48h染毒,高于106.5μg/ml剂量下,能引起HK-2细胞的凋亡.[结论]喹乙醇抑制HK-2细胞生长,有明显的细胞毒性,在本试验条件下,喹乙醇能诱导HK-2细胞的凋亡.
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