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[目的]CYP2A13是近年发现的一种主要在呼吸系统表达的肝外代谢酶,香烟烟雾中存在多种CYP2A13酶的底物(如尼古丁和NNK).由于尼古丁在香烟烟雾中的含量较高,其本身以及被CYP2A13代谢后的产物毒性低,因此,在香烟烟雾化合物中,尼古丁可能通过大量消耗CYP2A 13而影响或掩盖了CYP2A 13对香烟烟雾的代谢及其毒效应的评价,通过去除尼古丁,可以有效地再现CYP2A 13对其它有毒物质的代谢活性影响.[材料和方法]按照技术规范,采用自制的吸烟装置制备香烟烟雾提取物(CSE)；采用水、正己烷、甲醇和二氯甲烷作吸收液时制备CSE,筛选最佳的吸收液；采用高效液相色谱(HPLC)对代表性物质尼古丁进行分离、定性和定量分析；以HPLC中尼古丁稳定的保留时间为依据,将CSE分为尼古丁部分(CSE-N)和非尼古丁部分(CSE-O)；采用CCK-8实验检测CSE、CSE-N和CSE-O对稳定表达CYP2A 13的人支气管上皮BEAS-2B细胞(B-2A13)以及空载支气管上皮细胞(B-V)的毒作用,并采用流式细胞术和Hoechst 33258染色实验检测细胞凋亡,采用免疫印迹法检测细胞凋亡与DNA修复相关蛋白,初步探讨尼古丁对CYP2A13代谢活化CSE化合物的影响.[结果]采用水、正己烷、甲醇和二氯甲烷作吸收液时制备CSE,发现二氯甲烷的效果最佳；经与尼古丁标准品比对,CSE中的尼古丁在HPLC中的相对保留时间为20.208 min,含量为169.20±30.24 ng支香烟；CSE对B-2A13和B-V细胞都呈现一定的毒性,而CSE-N对两种细胞的毒效非常微弱,两细胞间未见差异；虽然CSE-N对B-2A13和B-V细胞都有毒效应,但其对B-2A13细胞的活性下降影响更为显著,8-MOP(CYP酶抑制剂)可显著抑制CSE-O所致的B-2A13细胞毒效应；流式细胞仪与Hoechst 33258染色实验均显示,CSE-O可显著提高B-2A13细胞的凋亡率,而CSE-N对其凋亡的影响很弱,接近于空白对照组；免疫印迹结果显示,CSE-O可显著增加B-2A 13细胞p-p53、p-Chk1、γ-H2AX和XLF蛋白的表达,而CSE-N对上述蛋白表达的影响不明显.[结论]香烟烟雾中的尼古丁可明显干扰CYP2A 13对其中非尼古丁物质的代谢活化效应,研究结果为深入阐明CYP2A13在吸烟所致呼吸系统损伤中的作用提供了实验依据.