miRNAs参与DBP/MBP影响波形蛋白表达而影响类固醇激素的合成过程

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cherish_zww
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  [目的]探讨不同剂量DBP/MBP对波形蛋白的调节机制及波形蛋白对类固醇激素合成的影响,以及miRNAs在此过程中的发挥的重要作用.[材料和方法]以小鼠睾丸Leydig细胞(mouse Leydig tumor cell,MLTC-1)和小鼠肾上腺皮质细胞(Y1 mouse adrenal tumor cell,Y1)为体外实验模,青春期大鼠为动物模型.MLTC-1和Y1细胞预培养24小时候暴露于10-7,10-6,10-5,104,10-3M MBP,分别用人绒毛膜促性腺激素(hCG)刺激MLTC-1细胞4小时和毛喉素(forskolin)刺激Y1细胞12小后测定细胞上清中孕酮含量,细胞裂解收集用于蛋白及其他实验的测定;青春期大鼠经灌胃给予0.1,1, 10,100,500mg/kg/d DBP,测定血清中睾酮含量以及睾丸中波形蛋白等蛋白的含量变化.[结果]细胞在10-7-10-4M MBP活力没有明显差异,而在10-3M MBP剂量组活力明显下降,因而选择10-3M MBP剂量组作为实验阳性对照.体外试验中,波形蛋白和类固醇急性调节蛋白(StAR)在10-7和10-6 M MBP剂量组表达含量上升,而在10-3M MBP剂量组表达含量明显下降;相应的,MLTC-1细胞在10-7和106M MBP剂量组孕酮含量表达上升,而Y1细胞只在10-7 M MBP剂量组孕酮含量表达上升,因而选择10-7M MBP剂量组来刺激细胞;动物实验中,波形蛋白和StAR在低剂量组表达上升,同时睾酮也表达量上升.细胞实验中,miRNA-200在低剂量MBP剂量组表达含量下降,而在10-3M MBP剂量组表达上升;在动物试验中,miRNA-200在低剂量DBP剂量组表达明显下降.当抑制细胞中miRNA-200表达时,波形蛋白表达上升,孕酮含量表达量也同时上升.细胞在转染后,不管是抑制miRNA-200表达,还是促进miRNA-200表达,当用10-7 M MBP刺激细胞后,孕酮含量表达都上升.[结论]研究表明波形蛋白在DBP/MBP影响类固醇激素合成过程中发挥着重要作用,而miRNA-200在此过程中可调节波形蛋白表达.
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