【摘 要】
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肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是抑制肌肉生长和发育的重要生长调控因子.本文通过cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆了草鱼MSTN-1全长cDNA,其全长为2190bp,开放阅读框长度为1128bp,可编码375个氨基酸,C端具有9个保守的半胱氨酸残基和RIRR的蛋白酶水解位点.序列比对显示,草鱼MSTN-1与斑马鱼MSTN-1的相似度高达96％,存在很强的进化保守性.RT-PCR
【机 构】
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上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室 上海 201306
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肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是抑制肌肉生长和发育的重要生长调控因子.本文通过cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆了草鱼MSTN-1全长cDNA,其全长为2190bp,开放阅读框长度为1128bp,可编码375个氨基酸,C端具有9个保守的半胱氨酸残基和RIRR的蛋白酶水解位点.序列比对显示,草鱼MSTN-1与斑马鱼MSTN-1的相似度高达96％,存在很强的进化保守性.RT-PCR结果分析表明,该基因在草鱼胚胎发育过程的各时期均有表达,但在胚胎后期表达较高；其在不同组织中的表达量存在较大差别,在眼、脑、骨骼肌中表达量较高,在肝、脾、心中表达量相对较低,而在性腺、鳃、肾和肠中无表达.整胚原位杂交结果显示,该基因不同时期表达存在比较明显差异,在20hpf时期主要在脊索区域表达,28hpf时期则在头部和尾部有表达,36hpf时期在头部和脊索就较高的表达量.通过显微注射MSTN-1反义mRNA至草鱼1-2细胞期胚胎,结果显示,MSTN反义mRNA可导致草鱼体节发生期胚胎脊柱出现北部肌肉增生,出现双脊柱现象,肌肉发育畸形明显.而通过显微注射MSTN-1 mRNA至斑马鱼胚胎,导致胚胎发育异常,体节发育受到强烈抑制而不分化等现象,通过整胚原位杂交表明在11h时相,肌节处MyoD基因表达紊乱,导致肌节分化出现异常.
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