肝癌组织中HBV RNA逆转录cDNA的初步研究

来源 :第八届全国肝脏疾病临床学术大会暨第四届中国-印度尼西亚肝病峰会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:skynini83
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  目的:用乙肝病毒(HBV)DNA探针检测冰冻肝癌(HCC)组织中HBVRNA逆转录的cDNA,探讨肝癌组织中HBV DNA转录隋况。方法:从冰冻肝癌组织中提取RNA;用SMART-PCR cDNA sylltheses试剂将其中RNA逆转录为cDNA,用PCR扩增cDNA;将cDNA用southern法转移到尼龙膜上;用地高辛标记的HBV DNA全序列反义链作为探针,与膜上的cDNA带杂交;检测膜上杂交的探针(胶片显影);比较分子量Marker确定胶片上显影cDlNA大小。结果:A,B,C三份肝癌组织中检测出的HBV cDNA带的数量和分子量分别是:A-条(2.5 kb),B两条(3.6 kb,2.1 kb),C-条(0.5kb);其中2.5 kb,3.6 kb和2.1 kb大小接近于标准的HBV RNA中2.4 kb,3.5 kb和2.1 kb RNA,而0.5 kb cDNA与标准的0.8 kb HBV RNA相差较大。结论:肝癌组织中HBV DNA转录可能受到干扰,并不一定产生全部四种HBV RNA;产生的cDNA有的与标准的HBV RNA分子量差别较大,可能存在与宿主细胞DNA共转录。
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