【摘 要】
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从兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)鳞茎中分离纯化淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)并研究其酶学性质。结果表明:选用30%～60%硫酸铵分级沉淀,SP纯化倍数为14.78,
【机 构】
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沈阳农业大学园艺学院,设施园艺省部共建教育部重点实验室/辽宁省设施园艺重点实验室,
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从兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)鳞茎中分离纯化淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)并研究其酶学性质。结果表明:选用30%～60%硫酸铵分级沉淀,SP纯化倍数为14.78,回收率为23%,纯化的SP亚基分子量约62.5kD;SP的最适反应体系缓冲液为pH5.0的柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液,最适反应温度为30℃,且体系中不适合加入酚类抑制剂聚乙烯吡咯烷酮(PVP);SP不耐强酸,在中性和弱碱性条件下活性稳定,pH<5时活性较弱;在合成方向上,SP对葡萄糖–1–磷酸(G-1-P)的Km值为2.84mmol·L-1;1mmol·L-1Mg2+、Ca2+对SP活性有极显著的促进作用,K+、Zn2+也有一定的促进作用;大部分离子在高浓度(>10mmol·L-1)下抑制SP活性,但Na+随着浓度的升高,对SP活性的促进作用增强;10mmol·L-1的抗坏血酸可将SP活性提高30%。
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