大肠杆菌表达重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的中试纯化

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重组人粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (rHuGM -CSF)表达产物在大肠杆菌中以包涵体的形式存在。方法 包涵体高压匀浆破菌抽提后 ,经凝胶过滤层析、复性、离子交换层析及凝胶过滤层析等纯化步骤。结果终产物纯度达 97% ,比活性达 1 2× 10 7U/mg蛋白 ,测定N端 2 0个氨基酸系列与其DNA系列推导的氨基酸系列完全一致。 The recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (rHuGM-CSF) expression product is present in the form of inclusion bodies in E. coli. Methods Inclusion body high pressure homogenate broken bacteria extraction, by gel filtration chromatography, renaturation, ion exchange chromatography and gel filtration chromatography and other purification steps. Results The purity of the final product was 97% and its specific activity was 12 × 10 7 U / mg. The 20 amino acid sequences at the N terminal were completely consistent with those deduced from the DNA series.
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