论文部分内容阅读
目的 通过调高MCF-7人乳腺癌细胞ADAM17的表达,探讨其对乳腺癌细胞侵袭力的影响.方法 MCF-7细胞成功转染慢病毒载体(LV8N-ADAM17)后,实验分为转染组、无义序列组、空白对照组,通过荧光显微镜观察转染效果.采用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法分别检测各组MCF-7细胞ADAM17、EGFRmRNA和ADAM17、EGFR蛋白的表达情况;采用细胞划痕实验与Transwell小室法分别检测过表达ADAM17对MCF-7细胞迁移力和侵袭力的影响.采用SPSS 17.0对数据进行统计学分析,组间比较采用单因素方差分析,两两多重比较采用LSD检验.结果 MCF-7细胞转染过表达的ADAM 17慢病毒,转染率为100％.转染组ADAM17mRNA表达量为1.79±0.08,高于无义序列组的1.16±0.07和空白对照组的1.13±0.05,差异有统计学意义,F=90.684,P＜0.001;转染组EGFRmR-NA表达量为1.72±0.15,高于无义序列组的1.21±0.04和空白对照组的1.17±0.09,F=26.215,P＜0.001;无义序列组和空白对照组的ADAM17mRNA、EGFRmRNA的表达量差异均无统计学意义,均P＞0.05.转染组ADAM17蛋白相对表达量为0.81±0.07,高于无义序列组0.52±0.04和空白对照组0.50±0.02,F=39.231,P＜0.001;转染组EGFR蛋白相对表达量为1.43±0.24、高于无义序列组的0.86±0.06和空白对照组的0.88±0.17,F=10.483,P＜0.001;无义序列组和空白对照组的ADAM17和EGFR蛋白表达量差异无统计学意义,均P＞0.05.转染组乳腺癌细胞划痕愈合率为(70.67±9.01)％,高于无义序列组(37.00±2.65)％和空白对照组(39.00±4.58)％,差异有统计学意义,F=85.784,P＜0.001.转染组的穿膜细胞数为(101.00±6.19)个/视野,高于无义序列组(76.35±6.41)个/视野和空白对照组(79.20±10.04)个/视野,差异有统计学意义,F=13.499,P＜0.001.结论 慢病毒载体有效地将过表达AD-AM17转染入MCF-7乳腺癌细胞,MCF-7乳腺癌细胞的侵袭力被显著提高.