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目的:新生儿缺氧缺血脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)也称新生儿缺氧缺血脑病(HIE)是危害新生儿健康的主要疾病,其病死率致残率非常高,已成为我国新生儿疾病研究的热点,该病基本病理改变是脑水肿和脑细胞坏死。水通道蛋白(AQPs)是近年来发现的一组与水通道有关的细胞膜转运蛋白,有研究显示AQP-4在成熟脑中的含量最高,对脑组织水的转运和平衡调节发挥重要作用,参与了脑损伤后脑水肿的形成。因此对AQP-4在新生动物HIBD时的研究,有助于为新生儿缺氧缺血脑病的治疗提供新的治疗思路。地塞米松对HIE的治疗尚有争议,它在治疗HIE过程中对脑组织中AQP4的表达影响尚未清楚。本实验通过western blot方法检测新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIBD)脑组织AQP-4、对照组新生大鼠脑组织AQP4、DEX治疗HIBD新生大鼠脑组织AQP4的表达情况。探讨DEX对缺氧缺血性脑病(HIE)新生鼠AQP4表达影响,为临床治疗新生儿缺氧缺血性脑病提供新思路、新途径,新方法,降低新生儿病死率和致残率。
方法:将健康7日龄SD新生大鼠(由哈尔滨医科大学附属二院动物中心提供)共96只(体重在12g至18g之间),随机分为3组:对照组32只、HIBD模型组32只、DEX治疗组32只,分别建模。HIBD动物模型的建立:新生大鼠分离左侧颈总动脉,并结扎,置鼠于常氧空气中30 min后,置低氧舱3h建模成功(低氧舱含流量为2L/min的92%N2与8%O2混合气、环境温度为37℃、湿度为85%)。建模成功后复氧。对照组仅分离左侧颈总动脉,不予颈总动脉结扎和缺氧,缝合切口常氧处理3.5h模型建成。地塞米松治疗组为HIBD组建模成功后立即内腹腔注射Dex(10mg/Kg)。三组均在模型制成后6h,24h,48h和72h分别处死动物(各时间点动物8只),断头取新生大鼠左脑,置于液氮中保存。通过western blot方法检测新生大鼠脑组织AQP-4表达情况。
结果:通过western blot方法检测新生大鼠脑组织AQP-4表达得出:不同时间点对照组相比较:AQP4表达无明显变化,(P>0.05);HIBD组与对照组相比较:AQP4表达呈动态变化,即从6h开始HIBD组AQP-4表达较对照组增加,24h达高峰,48h下降至72h仍高于正常对照组,(P<0.05);Dex治疗组与对照组相比较:6h、24h、48h均较对照组表达增加,72h时接近对照组,但仍略高于对照组,(P<0.05);Dex治疗组与HIBD组相比较:AQP4表达降低,且呈动态变化,即6h开始升高,24h达最大值,48h下降至72h,但与HIBD组比较均下降,且均高于对照组,至72h时趋于对照组,(P<0.05)。
结论:缺氧缺血后脑组织中AQP4表达增强,且呈先升高后下降的趋势,地塞米松可以明显改善新生鼠缺氧缺血时的脑组织水肿,抑制AQP4的表达,保护脑组织。推测临床上应用地塞米松治疗HIE,可改善临床症状,降低新生儿病死率和致残率。