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目的：探讨衰老信号途径p16INK4a/Rb与椎间盘退变程度之间的关系；
方法：成年健康新西兰白兔15只，随机分为5组(每组3只)：第2到5组，每组，采用倒八字手术入路，针刺法制作椎间盘退变模型(L3/4、L4/5和L5/6)，分别在术后2周、4周、8周及12周时进行相关检查；第1组只进行手术，而不针刺椎间盘，在术后12周时进行同样的检查。各组在相应时间点行MRI检查，观察椎间盘T2信号的变化情况。应用改良Thompson椎间盘退变分级系统对各组(L3/4、L4/5和L5/6)椎间盘进行退变程度分级(见表1)。将各组(L3/4、L4/5和L5/6)椎间盘统一编号，并按照改良Thompson分级系统分为4组：A组(Ⅰ级)、B组(Ⅱ级)、C组(Ⅲ级)和D组(Ⅳ级)。在上述每组中随机抽取3枚椎间盘，行组织学检查，按照Nishimura椎间盘退变分级法进行组织学评估(见表2)，采用免疫组化检测Ⅱ型胶原对椎间盘退变模型进行进一步评价，采用Western blot检测其中p16INK4a和Rb的蛋白水平。
结果：1)各组均成功实施手术，术后相应时间点进行MRI检查，改良Thompson椎间盘退变分级系统将椎间盘进行分组：假手术组中有8枚椎间盘为Ⅰ级和1枚椎间盘为Ⅱ级；术后2周组有2枚Ⅰ级，6枚Ⅱ级和1枚Ⅲ级；术后4周组有5枚Ⅱ级和4枚Ⅲ级；术后8周组有2枚Ⅱ级，5枚Ⅲ级和2枚Ⅳ级；术后12周组有2枚Ⅲ级和7枚Ⅳ(Ⅳ级)级。共计A组(Ⅰ级)10枚，B组(Ⅱ级)14枚，C组(Ⅲ级)12枚和D组9枚。
2)采用Nishimura椎间盘退变分级法对上述椎间盘进行组织学评估：A组有3枚0级；B组有1枚1级，2枚2级；C组有1枚1级，1枚2级和1枚3级；D组有1枚4级和2枚5级。
3)各组Ⅱ型胶原免疫组化灰度值分别为：A组144.30±0.68，B组148.77±3.09，C组151.47±2.93和D组1.55.80±4.75。各组之间差异具有统计学意义(F=14.36，P=0.01)。各组两两间进行比较，除B组和C组之间无明显统计学差异外(P>0.05)，其余差异均有统计学意义(P<0.01)。
4)各组p16INK4a相对蛋白含量为：A组0.20±0.05，B组0.56±0.31，C组0.92±0.09和D组1.62±0.24。各组之间差异具有统计学意义(F=35.22，P<0.01)。各组两两间进行比较，差异均有统计学意义(P<0.01)。从A组到D组，随着椎间盘退变程度的增加，p16INK4a相对蛋白含量呈逐渐升高趋势(P<0.05)。各组非磷酸化Rb相对蛋白含量为：A组0.51±0.04，B组0.88±0.19，C组1.114±0.13和D组1.71±0.27。各组之间差异具有统计学意义(F=32.12，P<0.01)。各组两两间进行比较，除B组和C组之间无明显统计学差异外(P>0.05)，其余各组间的差异均有统计学意义(P<0.01)。从A组到D组，随着椎间盘退变程度的增加，Rb相对蛋白含量呈逐渐升高趋势(P<0.05)。
结论：1)成功使用针刺法建立兔椎间盘退变模型。2)衰老信号通路p16INK4a/Rb存在于退变椎间盘中，且随着椎间盘退变程度的加重，p16INK4a/Rb通路表达增高，提示衰老信号通路p16INK4a/Rb在椎间盘退变过程中具有重要的作用。