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目的:脑出血是严重威胁人类健康的常见、多发性疾病,致残、致死率高。中医药治疗脑出血历史悠久,疗效确切,具有广阔的应用前景。我们在复元醒脑汤治疗脑出血的临床研究基础上,开展复元醒脑汤治疗高血压性脑出血的实验研究,从而为临床提供理论和实验依据。
方法:将SHR大鼠随机分为四组,分别为假手术组(N=20)、模型组(N=20)、安宫牛黄胶囊组(N=20)、复元醒脑汤组(N=20),并与WKY假手术组((N=20)对照。模型组、安宫牛黄胶囊组和复元醒脑汤组在收缩压达到21.3KPa基础上以胶原酶加肝素尾状核注射法诱发脑出血,建立高血压性脑出血模型,其中安宫牛黄胶囊组和复元醒脑汤组分别给予相应药物干预,于造模后连续灌胃3天。两假手术组脑内注射及灌胃均为生理盐水,模型组灌胃为生理盐水。运用光镜和透射电镜技术、放射免疫技术、Western blot技术等方法,分别观测各组动物神经缺损行为体征、脑组织含水量,血-脑屏障通透性,血肿周围脑组织病理形态学和超微结构变化,血肿周围脑组织中AQP-4蛋白表达水平及AVP含量变化。
结果:SHR模型组与WKY假手术组、SHR假手术组比较,神经缺损行为体征评分升高(均P<0.01),脑组织含水量增加(均P<0.01),脑组织中伊文思蓝含量亦增加(均P<0.01),并且出现病理形态学和超微结构改变,血肿周围脑组织中AQP-4蛋白表达上调(均P<0.01)、AVP含量增加(均P<0.01);SHR复元醒脑汤和SHR安宫牛黄胶囊两治疗组与SHR模型组比较,神经缺损行为体征评分降低(均P<0.01),脑组织含水量减少(均P<0.01),脑组织中伊文思蓝含量亦降低(均P<0.01),病理形态学和超微结构改变均明显改善,血肿周围脑组织AQP-4蛋白表达下调(均P<0.01)、AVP含量降低(均P<0.05);上述指标变化复元醒脑汤组与安宫牛黄胶囊组比较差异无统计学意义(均P>0.05);相关分析显示:脑组织含水量和脑组织中伊文思蓝含量呈正相关(相关系数r=0.711,P<0.01)、脑组织含水量和AQP-4蛋白表达表达呈正相关(相关系数r=0.928,P<0.01)、脑组织中伊文思蓝含量和AQP-4蛋白表达呈正相关(相关系数r=0.762,P<0.01)、脑组织AQP-4蛋白表达与AVP含量呈正相关(相关系数r=0.751,P<0.01)。
结论:1.本实验在建立的高血压性脑出血模型是一种与人类最常见的脑出血类型--高血压性脑出血更为接近的动物模型。2.高血压性脑出血大鼠AVP含量的增多,可能通过诱导AQP-4蛋白表达上调,进而升高血-脑屏障通透性,导致脑水肿和神经功能恶化。3.复元醒脑汤可能通过减少AVP含量,下调AQP-4蛋白表达,进而降低血.脑屏障通透性,减轻脑水肿程度,改善神经功能缺损,达到治疗高血压性脑出血的目的。