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目的:支气管肺发育不良(BPD)是小早产儿常见的慢性肺部疾病，近年来其发病率随重症监护技术及早产儿存活率的提高逐年增加，已成为新生儿重症监护室最棘手的问题之一。支气管肺发育不良发病机制极为复杂，研究表明宫内感染与之发生密切相关。本研究通过给孕鼠腹腔内注射脂多糖的方法建立宫内感染模型，并于生后腹腔内注射促红细胞生成素，观察宫内感染后早产新生鼠肺组织的病理变化，检测肺组织中MMP-9、TIMP-1的蛋白表达变化，探讨促红细胞生成素对宫内感染肺损伤的干预效应，进一步了解宫内感染与肺损伤之间的关系，并为其防治提供新方法。
方法：随机将15只孕鼠分为实验组(宫内感染组)和对照组(生理盐水组)，实验组(10只)于孕第15天时经腹腔内注射脂多糖(300μg/kg)建立宫内感染动物模型；对照组(5只)于孕第15天时经腹腔注射生理盐水(1ml/kg)，均于孕21天时行剖宫产术。将实验组所产新生鼠随机均分为促红细胞生成素(EPO )干预组(LPS+EPO组)与感染对照组(LPS组)，生理盐水组孕鼠所产新生鼠为正常对照组(NS组)。LPS+EPO组新生鼠生后即刻经腹腔内注射重组人促红细胞生成素(rhEPO)5000IU/kg，LPS组及NS组新生鼠于生后相同时间点均经腹腔注射等容积生理盐水。三组按照生后第1d、3d、7d、14d四个时间点各随机选取6只新生鼠进行肺组织HE染色观察其病理变化，显微镜下计算辐射状肺泡计数，免疫组化法检测肺组织MMP-9及TIMP-1的蛋白表达。
结果：1.HE染色：LPS组新生鼠与NS组比较，生后第7天时肺组织部分视野可见肺泡壁和间隔增宽，肺泡数减少；生后第14天时典型小直径的肺泡数目明显减少，肺泡间隔增厚，肺泡形成明显滞后。LPS+EPO组肺组织病理变化与LPS组相似，但程度有所减轻。三组新生鼠的肺组织均无明显肺实质纤维化改变。2.辐射状肺泡计数：LPS组生后第3天、7天、14天肺组织中辐射状肺泡计数较NS组明显减少(P＜0.01)；LPS+EPO组生后第3、7、14天辐射状肺泡计数较LPS组增加、但较NS组减少(P均＜0.01)。3.免疫组化检测肺组织内MMP-9的表达：LPS组生后第3、7、14天肺组织中MMP-9的蛋白表达较NS组显著增加(P＜0.01)；LPS+EPO组生后第3、7、14天MMP-9表达较LPS组减少、但较NS组增加(P均＜0.05)。LPS组与LPS+EPO组肺组织MMP-9表达各组组内比较显示生后3、7、14天表达均高于第1天(P均＜0.01)，但组内生后3、7、14天之间比较差别无意义(P＞0.05)。4.免疫组化检测肺组织内TIMP-1表达：LPS组生后第3天、7天、14天肺组织中TIMP-1表达较NS组显著增多(P＜0.01)；LPS+EPO组生后第3、7、14天TIMP-1表达较LPS组减少、但较NS组增加(P均＜0.05)。LPS组与LPS+EPO组肺组织中TIMP-1在生后表达均逐渐增加(P均＜0.05)，生后14天达高峰。
结论：1.宫内感染导致早产新生鼠肺泡数、肺泡次级分隔及辐射状肺泡计数减少，肺泡形成障碍，肺泡间隔增厚，表明宫内感染阻碍肺发育，由此产生的病理变化与BPD相似。2.宫内感染之后新生鼠肺组织中MMP-9、TIMP-1的表达量显著增加，提示二者参与了宫内感染肺损伤及组织修复过程；同时二者的表达不同步，可能在BPD的形成过程中意义重大。3.给予重组人促红细胞生成素进行干预后，早产鼠肺组织内MMP-9与TIMP-1表达均有所下降、宫内感染所致肺部病变有所缓解，提示促红细胞生成素可能通过影响二者表达进而对宫内感染所致的肺损伤及肺泡发育障碍起保护作用。
方法：随机将15只孕鼠分为实验组(宫内感染组)和对照组(生理盐水组)，实验组(10只)于孕第15天时经腹腔内注射脂多糖(300μg/kg)建立宫内感染动物模型；对照组(5只)于孕第15天时经腹腔注射生理盐水(1ml/kg)，均于孕21天时行剖宫产术。将实验组所产新生鼠随机均分为促红细胞生成素(EPO )干预组(LPS+EPO组)与感染对照组(LPS组)，生理盐水组孕鼠所产新生鼠为正常对照组(NS组)。LPS+EPO组新生鼠生后即刻经腹腔内注射重组人促红细胞生成素(rhEPO)5000IU/kg，LPS组及NS组新生鼠于生后相同时间点均经腹腔注射等容积生理盐水。三组按照生后第1d、3d、7d、14d四个时间点各随机选取6只新生鼠进行肺组织HE染色观察其病理变化，显微镜下计算辐射状肺泡计数，免疫组化法检测肺组织MMP-9及TIMP-1的蛋白表达。
结果：1.HE染色：LPS组新生鼠与NS组比较，生后第7天时肺组织部分视野可见肺泡壁和间隔增宽，肺泡数减少；生后第14天时典型小直径的肺泡数目明显减少，肺泡间隔增厚，肺泡形成明显滞后。LPS+EPO组肺组织病理变化与LPS组相似，但程度有所减轻。三组新生鼠的肺组织均无明显肺实质纤维化改变。2.辐射状肺泡计数：LPS组生后第3天、7天、14天肺组织中辐射状肺泡计数较NS组明显减少(P＜0.01)；LPS+EPO组生后第3、7、14天辐射状肺泡计数较LPS组增加、但较NS组减少(P均＜0.01)。3.免疫组化检测肺组织内MMP-9的表达：LPS组生后第3、7、14天肺组织中MMP-9的蛋白表达较NS组显著增加(P＜0.01)；LPS+EPO组生后第3、7、14天MMP-9表达较LPS组减少、但较NS组增加(P均＜0.05)。LPS组与LPS+EPO组肺组织MMP-9表达各组组内比较显示生后3、7、14天表达均高于第1天(P均＜0.01)，但组内生后3、7、14天之间比较差别无意义(P＞0.05)。4.免疫组化检测肺组织内TIMP-1表达：LPS组生后第3天、7天、14天肺组织中TIMP-1表达较NS组显著增多(P＜0.01)；LPS+EPO组生后第3、7、14天TIMP-1表达较LPS组减少、但较NS组增加(P均＜0.05)。LPS组与LPS+EPO组肺组织中TIMP-1在生后表达均逐渐增加(P均＜0.05)，生后14天达高峰。
结论：1.宫内感染导致早产新生鼠肺泡数、肺泡次级分隔及辐射状肺泡计数减少，肺泡形成障碍，肺泡间隔增厚，表明宫内感染阻碍肺发育，由此产生的病理变化与BPD相似。2.宫内感染之后新生鼠肺组织中MMP-9、TIMP-1的表达量显著增加，提示二者参与了宫内感染肺损伤及组织修复过程；同时二者的表达不同步，可能在BPD的形成过程中意义重大。3.给予重组人促红细胞生成素进行干预后，早产鼠肺组织内MMP-9与TIMP-1表达均有所下降、宫内感染所致肺部病变有所缓解，提示促红细胞生成素可能通过影响二者表达进而对宫内感染所致的肺损伤及肺泡发育障碍起保护作用。