论文部分内容阅读
本论文包括两个部分：（一）t(11;17)急性早幼粒细胞白血病发病机制及其白血病起始细胞靶向治疗研究；（二）t(8;21）急性髓系白血病多步骤发病机制的临床回顾性研究：AMLl-ET09a与C-KIT基因突变/高表达密切相关且是患者预后不良的因素。通过对不同急性髓系白血病发病机制及药物靶向治疗的研究，为开发更为有效的治疗药物和进一步优化治疗方案奠定基础。
第一部分t(11；l7)急性早幼粒细胞白血病小鼠模型白血病起始细胞的鉴定及其靶向治疗研究
急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性髓系白血病的一种特殊亚型，特征是粒细胞分化阻滞在早幼粒阶段。约2％的患者携带t(ll；17)染色体易位形成的PLZF-RARa和RARa-PLZF融合基因，并对全反式维甲酸(ATRA)诱导分化治疗具有耐药性。为研究t(11;17) AIL这一耐药机制并优化治疗方案，建立了一种同时带有PLZF-RARa和RARa-PLZF融合基因的可移植转基因小鼠白血病模型，使之较忠实地模拟人类APL基因型及表型。证实t(11;17)APL的白血病起始细胞(LIC)富集于髓系定向祖细胞群体中(Mac-1+/Gr-1+/e-Kit+)。通过筛选多种可能与ATRA产生协同作用的药物，发现8-(4-氯苯基硫代)-3’，5’-环磷酸腺苷(8-CPT-cAMP)能加强ATRA诱导细胞分化作用并显著改善ATRA对白血病细胞的转化激活作用。这种效应归因于白血病细胞中SMRT/NCoR1复合体与PLZF-RARa蛋白质的相互作用被加速解离，继而改变所在的染色质构象并重新激活在病理状态下被抑制的维甲酸通路。小鼠体内药物治疗表明，8-CPT-cAMP可通过对LIC有效的清除而显著增强ATRA治疗效果。这些结果表明，增强对白血病细胞的诱导分化作用可以改善t(11;17) APL的疗效。
第二部分t(8;21)急性髓系白血病多步骤发病机制的临床回顾性研究
AMLI-ETO9a与C-KIT基因突变/高表达密切相关且是患者预后不良的因素t(8;21)急性髓系白血病(AML)主要来自于急性髓系白血病M2亚型(t(8;21) AML-M2），由于t(8；21)染色体易位产生了AMLI-ETO融合基因。近期研究显示，AMLI-ETO的选择性剪切转录本AML1-ET09a可以在小鼠中引起AML，可能是t(8;21) AML-M2的重要致病分子。为了明确其临床意义，收集了118例t(8;21)AML-M2患者的骨髓标本，利用定性及巢式定量PCR的方法检测了AML1-ET09a的表达情况。根据检测结果，118例病人被分成AML1-ET09a-H组(n=86，定性PCR显示AMI1-ET09a阳性，定量PCR检测AMLl-ET09a表达量较高)及AML1-ET09a-L组(n=32，定性PCR显示AML1-ET09a阴性，定量PCR检测AML1-ET09a--达量较低)。对这两组患者标本进行了C-KIT因表达量的检测，其中AML1-ET09a-H组C-KIT达量明显高于AML1-ET09a-L组。115例患者检测了C-KIT突变，有36例患者存在C-KIT突变，其中32例在AMLI-ET09a-H组，AML1-ET09a与C-KIT突变高度相关。对患者临床随访结果显示，AML1-ET09a-H组病人比AML1-ET09a-L组初发时白细胞数高，骨髓中异常中幼粒细胞少，CD56表达量高，CD19表达量少。而且，AML1-ET09a-H组患者的无事件生存期(EFS)及总的生存期，(OS)明显短于AML1-ET09a-L组（P值分别是P=-0.0072及P=-0.0076）。综上所述，在t(8;21) AML-M2中AML1-ET09a与c-KIT基因突变/高表达密切相关，且AML1-ETOga是患者预后不良的因素。