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败血症(sepsis)是一种由细菌或细菌产物如细菌内毒素出现在血流中导致的严重的综合征。在败血症的过程中,机体的免疫、凝血、纤溶系统都被激活,更重要的是免疫系统功能的失调,因此,败血症也被看作是宿主不能成功抑制感染时的一种复杂的炎症失调。炎症失调会导致败血症休克并最终导致多器官功能障碍,这使得其成为住院病人最重要的死亡原因,死亡率达28~47%。
在其病理生理过程中,促炎因子和抗炎因子的功能失衡处于核心地位。众多的研究表明,肿瘤坏死因子—α(tumor necrosis factorα,TNF—α)是导致败血症休克的中心介质,白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素—6(interleukin—6,IL—6)等促炎因子以及抗炎因子白介素-10(interleukin-10,IL-10)等也在败血症的发病机制中占有举足轻重的地位。
对于败血症,目前的治疗方法疗效有限。治疗方法主要包括标准疗法、激活蛋白C(activated protein C,APC)疗法、抗细胞因子疗法等。APC是第一个成功用于临床治疗严重败血症的药物,然而它严重的出血副作用限制了它的广泛应用。因此,寻找高效低副作用的治疗已经成为当务之急。此外,虽然众多的抗细胞因子疗法还处于探索阶段,但越来越多的证据表明,抑制细胞因子在早期所造成的病理损伤,辅以抗凝疗法,可能成为临床治疗败血症、开发新药的一个新思路。
重组蛇毒纤溶酶(recombiant fibrinogenase FⅡ,rFⅡ)是本实验室通过基因工程自行研制的新型溶栓药。本课题组前期的研究工作证实,rFⅡ对促炎细胞因子TNF—α具有水解作用,兼具水解纤维蛋白的抗凝作用,故本文对rFⅡ在败血症中的作用进行探索。
研究目的:
探讨rFⅡ是否有治疗败血症的作用并探讨其可能机制,为rFⅡ作为败血症治疗药物提供科学的实验室依据。
方法:
1.利用盲肠结扎穿孔法在大鼠身上诱导败血症,观察rFⅡ对败血症大鼠生存率的作用。
2.造模后不同时间点采血,取上清,采用双抗体夹心酶联免疫(ELISA)法,测定败血症各治疗组血清中TNF—α、IL-1β、IL—6、IL-10的浓度。
3.取败血症各治疗组大鼠的肝、肾、肺做病理切片,观察rFⅡ对败血症大鼠病理的影响。
4.采用全自动生化分析仪,测量败血症各治疗组血清中BUN、ALT、Cr的浓度。
结果:
1.rFⅡ能够显著提高败血症大鼠的24小时生存率。
2.rFⅡ能够降低败血症大鼠血清中TNF—α和IL-1β的水平,能提高IL-10的水平,对IL—6水平的影响不显著。
3.rFⅡ能明显改善败血症大鼠肺部病理状况,减轻肺水肿、出血、炎症细胞浸润等变化。未观察到CLP对大鼠肝肾有肉眼可见的损伤。
4.rFⅡ能显著降低败血症大鼠血清中BUN、ALT、Cr水平,对败血症大鼠的肝肾功能起保护作用。
结论:
rFⅡ能提高败血症大鼠的生存率,降低促炎因子水平,提高抗炎因子水平,改善肺的病理损伤,保护肝肾功能,对大鼠败血症具有较好的治疗作用。