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第一部分小檗碱靶向FABPs调节脂肪酸代谢抑制肿瘤生长的体内外研究
目的
研究小檗碱对胃癌细胞系MGC803及其MGC803皮下移植瘤的抗肿瘤效应，探讨脂质代谢在小檗碱抗肿瘤效应中的分子机制。
方法
体外实验：不同浓度的小檗碱处理胃癌细胞系MGC803，MTT试剂检测MGC803细胞活性，评估小檗碱对MGC803细胞的毒性作用；Annexin-VFITC凋亡检测试剂检测MGC803的凋亡情况，评估小檗碱对MGC803细胞的凋亡诱导效应；TG含量检测试剂和T-CHO含量检测试剂检测MGC803细胞及其细胞上清液的脂质含量变化，评估小檗碱对MGC803细胞的脂质代谢的调节作用；WesternBlot检测凋亡相关蛋白和脂质代谢关键蛋白的表达，探讨小檗碱对MGC803细胞发挥效应的分子机制。
体内实验：建立MGC803裸鼠皮下移植瘤模型，予以小檗碱灌胃治疗。实验过程中测量裸鼠体重变化，观察小檗碱对其是否有不良反应；测量皮下移植瘤体积，观测小檗碱对MGC803皮下移植瘤生长的抑制效应；TUNEL实验检测皮下移植瘤组织的凋亡情况，评估小檗碱对皮下移植瘤组织的凋亡诱导效应；TG含量检测试剂和T-CHO含量检测试剂检测皮下移植瘤组织及血清的脂质含量变化，评估小檗碱对MGC803皮下移植瘤模型的脂质代谢调节作用；WesternBlot检测凋亡相关蛋白和脂质代谢关键蛋白的表达，探讨小檗碱抑制MGC803皮下移植瘤生长、诱导凋亡、调节脂质代谢的分子机制。
结果
体外实验：小檗碱抑制人胃癌细胞系MGC803细胞增殖，呈现时间和剂量依赖效应；小檗碱可诱导MGC803细胞凋亡，诱导效应呈现剂量依赖性，即小檗碱浓度越高，诱导凋亡效应越强；小檗碱可抑制FABP5和PPARα的蛋白表达，致MGC803细胞内脂肪酸的累积。FABPs抑制剂BMS309403可抑制MGC803细胞增殖、诱导细胞凋亡、调节脂质代谢诱导脂肪酸的累积：可模拟小檗碱对MGC803细胞的作用效应。
体内实验：小檗碱可显著降低MGC803皮下移植瘤模型中肿瘤体积和重量，减缓肿瘤生长速度；小檗碱可诱导MGC803皮下移植瘤模型肿瘤组织凋亡；小檗碱可抑制MGC803皮下移植瘤模型肿瘤组织FABP5和PPARα的蛋白表达，导致肿瘤组织及裸鼠血清中的脂肪酸累积。
结论
小檗碱可抑制MGC803胃癌细胞系及MGC803皮下移植瘤组织中FABPs和PPARα的蛋白表达，致使MGC803细胞及MGC803皮下移植瘤组织中脂肪酸累积，诱导MGC803细胞及MGC803皮下移植瘤组织凋亡，进而对人胃癌MGC803细胞和MGC803皮下移植瘤发挥抗肿瘤作用。
第二部分小檗碱靶向HNF4α-WNT5a/β-catenin信号通路抑制胃癌在体移植瘤生长的实验研究
目的
研究小檗碱对胃癌皮下移植瘤生长的作用效应及分子机制，探索求证HNF4α-WNT5a/β-catenin信号通路在小檗碱抗肿瘤中的重要作用。
方法
同时建立胃癌细胞系MGC803和SGC7901皮下移植瘤模型，每种模型分别给予对照组和实验组裸鼠生理盐水和100mg/kg/d浓度的小檗碱灌胃治疗。实验过程中测量裸鼠体重变化，观察小檗碱对其是否有不良反应；实验过程中测量皮下移植瘤体积，观测小檗碱对MGC803和SGC7901皮下移植瘤生长的抑制效应；WesternBlot和RT-PCR实验检测HNF4α，WNT5a，β-catenin的蛋白和转录水平的表达，探讨小檗碱抑制MGC803和SGC7901皮下移植瘤生长的相关分子机制。
结果
无论在MGC803皮下移植瘤模型还是在SGC7901皮下移植瘤模型中，小檗碱均可显著降低皮下移植瘤的体积和重量，减慢皮下移植瘤模型中肿瘤的生长速率。小檗碱能够从转录和蛋白质水平下调肿瘤组织中HNF4α，WNT5a和β-catenin的表达水平。此外，小檗碱还可降低肝脏组织中HNF4α，WNT5a和β-catenin的蛋白表达水平。
结论
小檗碱可抑制胃癌细胞系MGC803和SGC7901皮下移植瘤模型中肿瘤组织的生长，其机制可能与小檗碱下调肿瘤组织和肝脏组织中的HNF4α-WNT5a/β-catenin信号通路的表达有关。
目的
研究小檗碱对胃癌细胞系MGC803及其MGC803皮下移植瘤的抗肿瘤效应，探讨脂质代谢在小檗碱抗肿瘤效应中的分子机制。
方法
体外实验：不同浓度的小檗碱处理胃癌细胞系MGC803，MTT试剂检测MGC803细胞活性，评估小檗碱对MGC803细胞的毒性作用；Annexin-VFITC凋亡检测试剂检测MGC803的凋亡情况，评估小檗碱对MGC803细胞的凋亡诱导效应；TG含量检测试剂和T-CHO含量检测试剂检测MGC803细胞及其细胞上清液的脂质含量变化，评估小檗碱对MGC803细胞的脂质代谢的调节作用；WesternBlot检测凋亡相关蛋白和脂质代谢关键蛋白的表达，探讨小檗碱对MGC803细胞发挥效应的分子机制。
体内实验：建立MGC803裸鼠皮下移植瘤模型，予以小檗碱灌胃治疗。实验过程中测量裸鼠体重变化，观察小檗碱对其是否有不良反应；测量皮下移植瘤体积，观测小檗碱对MGC803皮下移植瘤生长的抑制效应；TUNEL实验检测皮下移植瘤组织的凋亡情况，评估小檗碱对皮下移植瘤组织的凋亡诱导效应；TG含量检测试剂和T-CHO含量检测试剂检测皮下移植瘤组织及血清的脂质含量变化，评估小檗碱对MGC803皮下移植瘤模型的脂质代谢调节作用；WesternBlot检测凋亡相关蛋白和脂质代谢关键蛋白的表达，探讨小檗碱抑制MGC803皮下移植瘤生长、诱导凋亡、调节脂质代谢的分子机制。
结果
体外实验：小檗碱抑制人胃癌细胞系MGC803细胞增殖，呈现时间和剂量依赖效应；小檗碱可诱导MGC803细胞凋亡，诱导效应呈现剂量依赖性，即小檗碱浓度越高，诱导凋亡效应越强；小檗碱可抑制FABP5和PPARα的蛋白表达，致MGC803细胞内脂肪酸的累积。FABPs抑制剂BMS309403可抑制MGC803细胞增殖、诱导细胞凋亡、调节脂质代谢诱导脂肪酸的累积：可模拟小檗碱对MGC803细胞的作用效应。
体内实验：小檗碱可显著降低MGC803皮下移植瘤模型中肿瘤体积和重量，减缓肿瘤生长速度；小檗碱可诱导MGC803皮下移植瘤模型肿瘤组织凋亡；小檗碱可抑制MGC803皮下移植瘤模型肿瘤组织FABP5和PPARα的蛋白表达，导致肿瘤组织及裸鼠血清中的脂肪酸累积。
结论
小檗碱可抑制MGC803胃癌细胞系及MGC803皮下移植瘤组织中FABPs和PPARα的蛋白表达，致使MGC803细胞及MGC803皮下移植瘤组织中脂肪酸累积，诱导MGC803细胞及MGC803皮下移植瘤组织凋亡，进而对人胃癌MGC803细胞和MGC803皮下移植瘤发挥抗肿瘤作用。
第二部分小檗碱靶向HNF4α-WNT5a/β-catenin信号通路抑制胃癌在体移植瘤生长的实验研究
目的
研究小檗碱对胃癌皮下移植瘤生长的作用效应及分子机制，探索求证HNF4α-WNT5a/β-catenin信号通路在小檗碱抗肿瘤中的重要作用。
方法
同时建立胃癌细胞系MGC803和SGC7901皮下移植瘤模型，每种模型分别给予对照组和实验组裸鼠生理盐水和100mg/kg/d浓度的小檗碱灌胃治疗。实验过程中测量裸鼠体重变化，观察小檗碱对其是否有不良反应；实验过程中测量皮下移植瘤体积，观测小檗碱对MGC803和SGC7901皮下移植瘤生长的抑制效应；WesternBlot和RT-PCR实验检测HNF4α，WNT5a，β-catenin的蛋白和转录水平的表达，探讨小檗碱抑制MGC803和SGC7901皮下移植瘤生长的相关分子机制。
结果
无论在MGC803皮下移植瘤模型还是在SGC7901皮下移植瘤模型中，小檗碱均可显著降低皮下移植瘤的体积和重量，减慢皮下移植瘤模型中肿瘤的生长速率。小檗碱能够从转录和蛋白质水平下调肿瘤组织中HNF4α，WNT5a和β-catenin的表达水平。此外，小檗碱还可降低肝脏组织中HNF4α，WNT5a和β-catenin的蛋白表达水平。
结论
小檗碱可抑制胃癌细胞系MGC803和SGC7901皮下移植瘤模型中肿瘤组织的生长，其机制可能与小檗碱下调肿瘤组织和肝脏组织中的HNF4α-WNT5a/β-catenin信号通路的表达有关。