【摘 要】
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以粘粒pKC505为载体构建了节杆菌BT801的基因组文库.用功能筛选的方法从文库中筛选得到了具有乙内酰脲酶活性的阳性克隆,经过亚克隆获得了编码乙内酰脲消旋酶（HyuR）、乙内酰脲
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以粘粒pKC505为载体构建了节杆菌BT801的基因组文库.用功能筛选的方法从文库中筛选得到了具有乙内酰脲酶活性的阳性克隆,经过亚克隆获得了编码乙内酰脲消旋酶（HyuR）、乙内酰脲水解酶（HyuH）和N-氨甲酰氨基酸水解酶（HyuC）的新序列.将3个酶的结构基因串联置于表达质粒pQE70 T5启动子的下游实现了3个基因的活性共表达,其活性是出发菌株A.BT801的2倍.用pQE表达载体对3个基因进行了分别表达,目的蛋白均占全菌蛋白40﹪以上.以乙内酰脲酶启动子为基础构建了新表达载体,将α-淀粉酶报告基因置于启动子的下游,获得了活性表达,研究发现大肠杆菌中不存在对乙内酰脲酶启动子进行调控的基因.上述工作为乙内酰脲酶在氨基酸生产中的应用、结构和功能的关系以及基因调控等研究奠定了基础.
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