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目的:本实验利用新生大鼠建立人工喂养+缺氧复氧冷刺激+腹腔注射LPS造成的新生鼠坏死性小肠结肠炎模型,并通过对新生鼠一般情况、体重变化、肠组织病理变化、肠组织中VIP及CCK的浓度研究,探讨生大黄在治疗新大生鼠肠损伤中对肠组织中VIP和CCK浓度的影响,进而为指导临床生大黄治疗NEC提供理论依据。
方法:选用新生3日龄新生大鼠72只,随机分为6组,每组12只,设组别:A空白对照组、B模型组、C西咪替丁组、D高剂量生大黄组、E中剂量生大黄组、F低剂量生大黄组;除A组仅人工喂养,余组以NEC造模是通过人工喂养(4次/日)+[缺氧(通15L/min氮气至0%氧气,90s)+复氧(100%氧气下,10min)+冷刺激(4℃下,10min);2次/日]+注射LPS(10mg/kg,1次/日),均连续3天。同时D、E、F组是以高(1.32mg/kg·次)、中(0.66mg/kg·次)、低(0.33mg/kg·次)剂量生大黄免煎液干预,C组以西咪替丁混悬液(0.01mg/kg·次)灌胃,B组以0.9%生理盐水灌胃,3次/日,连续3天。末次喂养后禁食12h,于第4天以颈椎脱臼法处死,取肠组织回盲部HE染色,进行肠组织病理评分,结合实验前后新生大鼠体重变化,以及用ELISA双抗夹心法检测在NEC病情变化中发挥着重要作用的肠组织VIP和CCK的浓度,从而讨论生大黄对新生大鼠坏死性小肠结肠炎的治疗作用及对两种激素的影响。
结果:1.一般情况及体重变化:A组生长发育相对良好,B、C组相较与D、E、F组倦怠嗜睡、对刺激反应减弱、腹部胀满、褐色稀便出现的时间较早,情况严重重。体重比较:A组与B模型组比较,有统计学差异(P<0.05);D、E、F组体重各自与模型组相比,有统计学差异(P<0.05);D、E、F组各自与西咪替丁组,有统计学差异(P<0.05);高、中、低剂量生大黄组之间比较,有统计学差异(P<0.05)。2.HE染色:A组肠组织结构相对完整;B、C组肠绒毛完全脱落,腺体排列紊乱,黏膜下层和固有层水肿分离严重;D组、E组、F组不同程度肠绒毛破碎断裂,部分黏膜下层和固有层轻度水肿分离。3.肠组织病理评分:模型组肠组织评分为2.42>2分,且发病率为100%,说明造模成功;D、E、F组分别与B模型组相比,存在统计学差异(P<0.05);而D、E、F组间比较,B、C之间比较,无统计学差异(P>0.05)。4.肠组织中VIP与CCK含量变化:与A组比较,B组VIP浓度降低、CCK浓度升高,有统计学差异(P<0.05);与B组比较,D、E、F组各自VIP不同浓度升高、CCK不同浓度降低,有统计学差异(P<0.05);C组的VIP浓度、CCK浓度分别与D、E、F组比较,有统计学差异(P<0.05);B、C组之间,D、E、F组组间VIP、CCK浓度各自无差异,无统计学意义(P>0.05)。
结论:生大黄可有效改善NEC新生大鼠肠组织回盲部的病理形态,能使肠组织中VIP浓度升高和CCK浓度降低,从而减轻新生大鼠NEC的损伤程度。
方法:选用新生3日龄新生大鼠72只,随机分为6组,每组12只,设组别:A空白对照组、B模型组、C西咪替丁组、D高剂量生大黄组、E中剂量生大黄组、F低剂量生大黄组;除A组仅人工喂养,余组以NEC造模是通过人工喂养(4次/日)+[缺氧(通15L/min氮气至0%氧气,90s)+复氧(100%氧气下,10min)+冷刺激(4℃下,10min);2次/日]+注射LPS(10mg/kg,1次/日),均连续3天。同时D、E、F组是以高(1.32mg/kg·次)、中(0.66mg/kg·次)、低(0.33mg/kg·次)剂量生大黄免煎液干预,C组以西咪替丁混悬液(0.01mg/kg·次)灌胃,B组以0.9%生理盐水灌胃,3次/日,连续3天。末次喂养后禁食12h,于第4天以颈椎脱臼法处死,取肠组织回盲部HE染色,进行肠组织病理评分,结合实验前后新生大鼠体重变化,以及用ELISA双抗夹心法检测在NEC病情变化中发挥着重要作用的肠组织VIP和CCK的浓度,从而讨论生大黄对新生大鼠坏死性小肠结肠炎的治疗作用及对两种激素的影响。
结果:1.一般情况及体重变化:A组生长发育相对良好,B、C组相较与D、E、F组倦怠嗜睡、对刺激反应减弱、腹部胀满、褐色稀便出现的时间较早,情况严重重。体重比较:A组与B模型组比较,有统计学差异(P<0.05);D、E、F组体重各自与模型组相比,有统计学差异(P<0.05);D、E、F组各自与西咪替丁组,有统计学差异(P<0.05);高、中、低剂量生大黄组之间比较,有统计学差异(P<0.05)。2.HE染色:A组肠组织结构相对完整;B、C组肠绒毛完全脱落,腺体排列紊乱,黏膜下层和固有层水肿分离严重;D组、E组、F组不同程度肠绒毛破碎断裂,部分黏膜下层和固有层轻度水肿分离。3.肠组织病理评分:模型组肠组织评分为2.42>2分,且发病率为100%,说明造模成功;D、E、F组分别与B模型组相比,存在统计学差异(P<0.05);而D、E、F组间比较,B、C之间比较,无统计学差异(P>0.05)。4.肠组织中VIP与CCK含量变化:与A组比较,B组VIP浓度降低、CCK浓度升高,有统计学差异(P<0.05);与B组比较,D、E、F组各自VIP不同浓度升高、CCK不同浓度降低,有统计学差异(P<0.05);C组的VIP浓度、CCK浓度分别与D、E、F组比较,有统计学差异(P<0.05);B、C组之间,D、E、F组组间VIP、CCK浓度各自无差异,无统计学意义(P>0.05)。
结论:生大黄可有效改善NEC新生大鼠肠组织回盲部的病理形态,能使肠组织中VIP浓度升高和CCK浓度降低,从而减轻新生大鼠NEC的损伤程度。