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目的: 通过建立铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)生物膜体外模型和铜绿假单胞菌生物膜感染大鼠肺部体内模型，以黄芩苷、黄芪甲苷进行干预，阿奇霉素和生理盐水为对照，观察比较各组用药干预后生物膜的形态学改变、胞外多糖蛋白复合物的含量、实时荧光定量PCR检测LasImRNA的表达情况、动物肺部病理特点及细菌学指标等。探究黄芪甲苷、黄芩苷等不同中药单体对PA生物膜形成的影响，为中医临床治疗铜绿假单胞菌奠定实验基础，且为进一步研究铜绿假单胞菌耐药机制提供实验依据。 方法: 1、体外实验:参照文献中方法建立体外PA生物膜模型，分别加入对应的中药单体，并设置阿奇霉素和生理盐水对照，利用FITC-ConA对PA生物膜进行染色并在荧光共聚焦显微镜下观察其形态;此外，TRIzol法提取PA生物膜总RNA，实时荧光定量PCR检测LasImRNA的表达情况，并对PA生物膜多糖蛋白复合物(GXL)含量进行测定。 2、体内实验:取60只纯种健康雄性SPF级SD大鼠随机分为实验组（50只）和空白对照组（10只），除空白对照组外，其余大鼠均通过弯曲灌胃针向大鼠气管内注入0.1ml1×109CFU/ml藻酸盐微粒包裹的PAO1菌悬液，建立PA生物膜肺部感染动物模型。建模后每天对实验组分别腹腔注射黄芪甲苷、黄芩苷、黄芪甲苷+黄芩苷、阿奇霉素及生理盐水，记录体重，于10天后取肺组织评估病理学特点，测定细菌学指标;TRIzol法提取PA生物膜总RNA，实时荧光定量PCR检测LasImRNA的表达情况。 结果: 1、体外实验:与生理盐水组比，在生物膜结构改变和抑制生物膜生长方面，黄芩苷组、黄芪甲苷+黄芩苷组、阿奇霉素组效果明显，差异有统计学意义(P＜0.05)，但黄芪甲苷组作用效果不明显，差异无统计学意义(P＞0.05)。多糖蛋白复合物产量:与生理盐水组相比，黄芩苷组、黄芪甲苷+黄芩苷组、阿奇霉素组多糖蛋白复合物产量明显减少，差异有统计学意义(P＜0.05)，黄芪甲苷组不明显，差异无统计学意义(P＞0.05)。RT-PCR结果显示:黄芩苷组、黄芪甲苷+黄芩苷组、阿奇霉素组与生理盐水组相比，RNA抑制作用明显，差异有统计学意义(P＜0.01)。黄芪甲苷组不明显，差异无统计学意义(P＞0.05)。值得注意的是黄芩苷单用比黄芩苷+黄芪甲苷更能抑制生物膜的生成，差异有统计学意义(P＜0.05)，相同的结果出现在多糖蛋白复合物产量及RT-PCR结果显示中。 2、体内实验，肺组织匀浆菌落计数结果显示:在抑菌方面，与生理盐水组相比，黄芩苷组、黄芪甲苷+黄芩苷组、阿奇霉素组，差异均有统计学意义(P＜0.01)，黄芪甲苷组与生理盐水相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。RT-PCR结果显示:各治疗组与生理盐水组相比，差异均有统计学意义(P＜0.01)。黄芩苷组、黄芪甲苷组在抑制LasImRNA表达方面与阿奇霉素效果相仿(P＞0.05)。各组中抑制LasImRNA表达最明显的是黄芩苷+黄芪甲苷组，优于两个中药单体单用，差异均有统计学意义(P＜0.01)。 结论: 本研究成功地建立铜绿假单胞菌生物膜体外模型和铜绿假单胞菌生物膜感染大鼠肺部体内模型;评价了黄芩苷、黄芪甲苷干预大鼠肺部感染铜绿假单胞菌生物膜的疗效。进一步观测铜绿假单胞菌生物膜的生长、胞外多糖蛋白复合物的含量、群体感应系统LasImRNA、动物肺部病理特点及细菌学等指标，为深入研究铜绿假单胞菌耐药机制提供了实验依据和为中医临床治疗铜绿假单胞菌奠定实验基础。 1、体外实验:体外实验中黄芩苷在干预铜绿假单胞菌生物膜、减少多糖蛋白复合物产量与抑制mRNA的表达效果方面均有明显作用，黄芪甲苷体外实验干预铜绿假单胞菌生物膜、减少多糖蛋白复合物产量与抑制mRNA的表达效果方面均无明显作用。 2、体内实验:黄芩苷抑菌效果最好，黄芪甲苷抑菌作用不明显;黄芩苷+黄芪甲苷抑制LasImRNA效果最好，黄芩苷、黄芪甲苷均有明显的抑制LasImRNA的表达，但黄芩苷和黄芪甲苷合用后效果更明显。