【摘 要】
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目的:探讨凝胶多糖在人角膜上皮细胞(HCECs)对烟曲霉菌的固有免疫应答中的作用以及C型凝集素受体Dectin–1是否能够介导凝胶多糖的免疫调节作用。 方法:用不同浓度(50,100,200,400μ克/毫升)和不同时间的凝胶多糖刺激HCECs。然后用经过和未经过昆布多糖(Dectin-1受体阻断剂,0.3毫克/毫升)处理的HCECs,另外用烟曲霉菌菌丝刺激凝胶多糖。肿瘤坏死因子(TNF-α)白
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目的:探讨凝胶多糖在人角膜上皮细胞(HCECs)对烟曲霉菌的固有免疫应答中的作用以及C型凝集素受体Dectin–1是否能够介导凝胶多糖的免疫调节作用。
方法:用不同浓度(50,100,200,400μ克/毫升)和不同时间的凝胶多糖刺激HCECs。然后用经过和未经过昆布多糖(Dectin-1受体阻断剂,0.3毫克/毫升)处理的HCECs,另外用烟曲霉菌菌丝刺激凝胶多糖。肿瘤坏死因子(TNF-α)白细胞介素-6(IL-6)的mRNA水平和蛋白水平表达分别用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。Dectin-1的蛋白表达采用蛋白质印迹(Westernblot)检测。
结果:凝胶多糖以时间和剂量依赖的方式刺激HCECs观察TNF-α和IL-6的mRNA的表达。在用烟曲霉菌菌丝刺激前用凝胶多糖预处理HCECs可以显著提高TNF-α和IL-6在mRNA和蛋白水平的表达(p<0.05)。凝胶多糖和烟曲霉菌菌丝均可提高HCECs中Dectin-1的蛋白表达。并且在用烟曲霉菌刺激之前用凝胶多糖预处理HCECs,其Dectin-1的表达会提高到1.5-2倍。用Dectin-1抑制剂昆布多糖预处理HCECs可以明显抑制由凝胶多糖和烟曲霉菌菌丝诱导所产生的TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白的表达。
结论:这些研究结果表明经凝胶多糖预处理的HCECs能够增强烟曲霉菌菌丝诱导的炎症反应。Dectin-1对凝胶多糖发挥的免疫调节作用是必不可少的。凝胶多糖在真菌性角膜炎的治疗中可能有较高的潜在应用价值。
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