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目的：通过观察烟曲霉菌感染的人角膜上皮细胞中肺表面活性蛋白D(surfactantproteinD,SP-D)的表达，探讨SP-D在真菌感染过程中激活机制及其与TLR4信号传导通路之间的相互作用。
方法：以体外培养的正常人永生化角膜上皮细胞作为对照组，实验组以灭活的烟曲霉菌菌丝、TLR4抑制剂CLI-095刺激人永生化角膜上皮细胞，用Westernblot法检测SP-D蛋白表达，用real-timePCR法检测SP-DmRNA，用SP-D抗体、重组人SP-D(recombinationhumanSP-D,rhSP-D)、CLI-095及MyD88抑制剂(Pepinh-MYD)分别预处理人永生化角膜上皮细胞后予以烟曲霉菌刺激，用real-timePCR法及ELISA法分别检测IL-1β、IL-8的mRNA及蛋白表达水平。
结果：灭活的烟曲霉菌菌丝刺激人角膜上皮细胞后引起SP-D基因和蛋白表达水平增高，分别在处理16h及20h时达到峰值，这种真菌刺激引起SP-D升高的趋势可被CLI-095所抑制。rhSP-D预处理角膜上皮细胞4h后予以烟曲霉菌菌丝刺激，IL-1β、IL-8的mRNA及蛋白水平较无rhSP-D组显著降低，而当以SP-D抗体预处理角膜上皮细胞1h再予以烟曲霉菌菌丝刺激时，IL-1β、IL-8的表达较无SP-D抗体组显著升高。CLI-095或Pepinh-MYD分别预处理细胞后，再给予rhSP-D及烟曲霉菌共同刺激，IL-1βandIL-8mRNA及蛋白表达较无CLI-095或Pepinh-MYD组升高。其表达变化差异均有统计学意义。
结论：SP-D存在于正常人角膜上皮细胞中，烟曲霉菌菌丝刺激可引起其表达升高，TLR4蛋白可促进SP-D的产生。SP-D能够参与角膜上皮细胞识别烟曲霉菌菌丝抗原的过程，并调节下游炎症因子，在人角膜上皮细胞固有免疫早期阶段发挥作用。SP-D可通过影响TLR4信号传导通路调节下游炎症因子，具有抑制炎症的作用。
方法：以体外培养的正常人永生化角膜上皮细胞作为对照组，实验组以灭活的烟曲霉菌菌丝、TLR4抑制剂CLI-095刺激人永生化角膜上皮细胞，用Westernblot法检测SP-D蛋白表达，用real-timePCR法检测SP-DmRNA，用SP-D抗体、重组人SP-D(recombinationhumanSP-D,rhSP-D)、CLI-095及MyD88抑制剂(Pepinh-MYD)分别预处理人永生化角膜上皮细胞后予以烟曲霉菌刺激，用real-timePCR法及ELISA法分别检测IL-1β、IL-8的mRNA及蛋白表达水平。
结果：灭活的烟曲霉菌菌丝刺激人角膜上皮细胞后引起SP-D基因和蛋白表达水平增高，分别在处理16h及20h时达到峰值，这种真菌刺激引起SP-D升高的趋势可被CLI-095所抑制。rhSP-D预处理角膜上皮细胞4h后予以烟曲霉菌菌丝刺激，IL-1β、IL-8的mRNA及蛋白水平较无rhSP-D组显著降低，而当以SP-D抗体预处理角膜上皮细胞1h再予以烟曲霉菌菌丝刺激时，IL-1β、IL-8的表达较无SP-D抗体组显著升高。CLI-095或Pepinh-MYD分别预处理细胞后，再给予rhSP-D及烟曲霉菌共同刺激，IL-1βandIL-8mRNA及蛋白表达较无CLI-095或Pepinh-MYD组升高。其表达变化差异均有统计学意义。
结论：SP-D存在于正常人角膜上皮细胞中，烟曲霉菌菌丝刺激可引起其表达升高，TLR4蛋白可促进SP-D的产生。SP-D能够参与角膜上皮细胞识别烟曲霉菌菌丝抗原的过程，并调节下游炎症因子，在人角膜上皮细胞固有免疫早期阶段发挥作用。SP-D可通过影响TLR4信号传导通路调节下游炎症因子，具有抑制炎症的作用。