论文部分内容阅读
莱克多巴胺(Ractopamine)是一种β-受体激动剂类药物,在临床上常用作强心药,治疗充血性心力衰竭症,还可以用于治疗肌肉萎缩症等。动物日粮中莱克多巴胺的添加量为临床治疗剂量的5倍时,动物体内的营养成分由脂肪向肌肉转移,表现出营养再分配效应。美国食品药品管理局(FDA)于1999年允许该药品作为兽药在猪饲料添加剂中使用,随后巴西、委内瑞拉、哥伦比亚、危地马拉、菲律宾等其他国家也批准使用,但亚洲和欧洲的一些国家仍未授权该药物作为兽用促生长剂使用。莱克多巴胺在动物饲料中的蓄意添加会通过饮食给人类健康带来潜在威胁,因此,建立一种快速的、高选择性、重现性好的方法用于检测饲料及动物源食品中莱克多巴胺残留有重要实际意义。
本论文采用分子印迹技术,以莱克多巴胺为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,合成了对莱克多巴胺具有高选择性的分子印迹聚合物。通过优化聚合物的制备条件及固相萃取条件,建立了基于分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定各种基质试样中莱克多巴胺的检测方法。
不同的聚合反应条件直接影响合成印迹聚合物的吸附及识别性能。本文考察了三种单体(4-乙烯吡啶、2-乙烯吡啶和丙烯酰胺)和四种致孔剂(乙醇、乙腈、丙酮和氯仿)对合成聚合物性能的影响。通过L9(34)正交试验,优化的聚合反应配方为:1.0 mmol莱克多巴胺,4.0 mmol丙烯酰胺,20.0 mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯,6.0 mL乙腈/三乙胺(30:1,V/V),50.0 mg偶氮二异丁腈。
以制备的聚合物磨碎后作为固相萃取吸附剂,筛选粒径在38.5～74μm之间的聚合物颗粒150 mg装于带有滤板的空固相萃取小柱中,该固相萃取小柱的吸附容量达到2.57 mg g-1。优化活化、平衡、上样、淋洗和洗脱条件,得到理想的固相萃取方法为:3 mL甲醇活化,3 mL水平衡,1～10 mL甲醇-水、乙腈-水或水溶液上样,3 mL,水和3 mL甲醇依次淋洗,5％氨化甲醇5 mL洗脱,莱克多巴胺在制备的分子印迹固相萃取柱上的回收率达到90%以上,而非印迹固相萃取柱的回收率在30%以下。
建立了利用分子印迹固相萃取小柱从饲料和猪尿样品中净化、富集莱克多巴胺的方法,并与C18和MCX固相萃取柱比较。实验结果表明,分子印迹固相萃取小柱具有较高的回收率和较好的净化效果,所有样品的加标回收率均在70%以上,批内和批间变异系数均在15%以下。
本实验为复杂基质中莱克多巴胺的检测提供了新型固相萃取吸附材料,所建立的检测方法简单、准确、重现性好,能够满足各种检测要求。