动态生化分析及相关技术研究

来源 :中国科学院化学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhoujiayan
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该论文以5通道操作式条件反射训练箱,利用大鼠足趾电击一按键的操作式条件反射模型和微透析活体取样技术,实现了大鼠学习训练过程中大脑海马体的微透析动态采样,对微透析样品中的重要生理活性物质(乙酰胆碱、葡萄糖和乳酸)进行了检测.结果显示,实验组的乳酸和葡萄糖在整个采样过程中无明显波动.而对照组的乳酸在训练过程中明确降低至81±5﹪;对照组的葡萄糖在训练后也有明显变化(降低至82±5﹪).首次以实验证明了操作式条件反射训练过程中葡萄糖和乳酸的动态关系.其结果提示,与葡萄糖相比,乳酸能更迅速地反应大脑的动力学和新陈代谢.通过测定海马区细胞外液中乙酰胆碱(ACh)的含量,研究了septo-海马胆碱通路的活性.实验结果提示.操作式条件反射和电击两种过程虽然都可引发海马ACh释放的增加,但增幅不同.操作式条件反射过程中ACh释放的增幅明显小于电击过程,且持续时间短.而胆碱(Ch)的含量在两组中都无明显变化.建立了一种改进的微柱高效液相色谱-固定化酶反应器-电化学检测体系,考察了其检测乙酰胆碱和胆碱的性能参数.采用HRP酶和Fc介质将待测物转换为Fc<+>,在0V下检测其还原反应.在1-5000nmol/L浓度范围内获得了良好的线性响应,且检测限降低至2fmol/5μl(S/N=3:1).与传统方法相比,灵敏度提高了200倍,从而可实现透析液中ACh和Ch的准确检测.检测电压的降低,大大缩短了电极平均所需要的时间,有利于快速过程的研究.该方法有望取代传统的分析方法,成为检测ACh和Ch的新技术.利用TiO<,2>可催化多种有机物光化学分解的性质,进行了光化学催化液相色谱检测器的探索研究.设计并研制了一种结构简单的液相色谱检测器.以导电的TiO<,2>玻璃板为工作电极,Ag/AgCl为参比电极,采用薄层型流通池结构;光源用石英光导纤维经石英窗引入,光电流信号以微电流放大器检测.以罗丹明B、苯酚、OrangeⅡ和氨基乙酸等不同类型的物质为样品,对其检测性能进行了考察.初步实验结果表明,该检测池对罗丹明B具有良好的线性响应和重现性,最低检测限为10<-6>mol/L.该结果提示运用该思路设计液相色谱检测器具有可行性.
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