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柑橘是世界上最受欢迎的水果,但在贮藏和运输过程中,由真菌引起的采后病害严重危害柑橘产业,最常见的病害是由Penicilliumdigitatum引起的绿霉病和P.italicum引起的青霉菌。化学农药常被用作保鲜剂进行采后果实处理。由于杀菌剂管理严格和环境污染,人们对水果中化学残留的日益关注,使得杀菌剂的使用受到限制。近年来,生物防治已成为化学杀菌剂潜在的替代措施。本研究旨在从根际土壤和柑桔果皮中筛选出细菌菌株,防治柑橘青霉病和绿霉病。取得的主要结果如下:
在148株细菌菌株中,菌株SZS-6、Zj1-3、Zj1-9、Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11对绿霉病菌菌株Pd-1和青霉病菌菌株Pi-1具有抑制作用。菌株Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11对绿霉病菌菌株Pd-1菌丝生长的抑制作用达80%以上。对产生的拮抗物质的研究发现,菌株Zj2-3、Zj2-9和Zj2-1120%的拮抗物质对菌株Pd-1和Pi-1的菌丝生长抑制率达75%以上,并且显著抑制菌株Pd-1和Pi-1的孢子萌发,抑制率40%以上,但细菌菌株产生的挥发性物质对病原菌Pd-1和Pi-1的生长抑制效果不明显。
菌株Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11对柑橘其他常见采后病害病原菌的也有显著的抑制作用,可以抑制柑橘炭疽病菌菌株ATN-1和黑腐病病菌BR-1的生长,但对酸腐病菌HYS1-1均没有明显的作用,并且对柑橘酸腐病也没有明显的防治效果。
对菌株在柑橘伤口的定殖研究发现,25℃条件下28天后,接种在柑橘伤口中的菌株SZS-6、Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11的菌群数量从2×105CFU分别增加到7.07×107、1.15×106、1.77×106和1×106CFU。表明可以在柑橘伤口处形成稳定的群体。
生防菌株可以显著控制柑橘青霉病和绿霉病。刺伤条件下人工接种Pd-1和Pi-1(1×107孢子/mL),在25℃条件下,109CFU/mL生防菌处理伤口可以显著防治柑橘青霉病和绿霉病,其中Zj2-9和SZS-6的防效达90%以上。采用菌株SZS-6、Zj2-3、Zj2-9和Zj2-1的菌悬液(1×108CFU/mL)浸泡温州蜜柑果实30s,经15℃通风贮藏30d后,果实自然腐烂率由未处理的48.3%下降到25.7-21.8%,其中菌株Zj2-9和SZS-6的防效分别为50%和47.8%。
根据16srRNA和recA基因序列分,菌株Zj1-3和Zj1-9鉴定为Bacilluspumilus,菌株Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11鉴定为Bacillusvelezensis,SZS-6鉴定为Burkholderiacepacia。
综上所述,本研究筛选获得6株对柑橘青霉病和绿霉病具有潜在的控制作用的生防细菌菌株,为绿色防控柑橘采后病害积累了资源。
在148株细菌菌株中,菌株SZS-6、Zj1-3、Zj1-9、Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11对绿霉病菌菌株Pd-1和青霉病菌菌株Pi-1具有抑制作用。菌株Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11对绿霉病菌菌株Pd-1菌丝生长的抑制作用达80%以上。对产生的拮抗物质的研究发现,菌株Zj2-3、Zj2-9和Zj2-1120%的拮抗物质对菌株Pd-1和Pi-1的菌丝生长抑制率达75%以上,并且显著抑制菌株Pd-1和Pi-1的孢子萌发,抑制率40%以上,但细菌菌株产生的挥发性物质对病原菌Pd-1和Pi-1的生长抑制效果不明显。
菌株Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11对柑橘其他常见采后病害病原菌的也有显著的抑制作用,可以抑制柑橘炭疽病菌菌株ATN-1和黑腐病病菌BR-1的生长,但对酸腐病菌HYS1-1均没有明显的作用,并且对柑橘酸腐病也没有明显的防治效果。
对菌株在柑橘伤口的定殖研究发现,25℃条件下28天后,接种在柑橘伤口中的菌株SZS-6、Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11的菌群数量从2×105CFU分别增加到7.07×107、1.15×106、1.77×106和1×106CFU。表明可以在柑橘伤口处形成稳定的群体。
生防菌株可以显著控制柑橘青霉病和绿霉病。刺伤条件下人工接种Pd-1和Pi-1(1×107孢子/mL),在25℃条件下,109CFU/mL生防菌处理伤口可以显著防治柑橘青霉病和绿霉病,其中Zj2-9和SZS-6的防效达90%以上。采用菌株SZS-6、Zj2-3、Zj2-9和Zj2-1的菌悬液(1×108CFU/mL)浸泡温州蜜柑果实30s,经15℃通风贮藏30d后,果实自然腐烂率由未处理的48.3%下降到25.7-21.8%,其中菌株Zj2-9和SZS-6的防效分别为50%和47.8%。
根据16srRNA和recA基因序列分,菌株Zj1-3和Zj1-9鉴定为Bacilluspumilus,菌株Zj2-3、Zj2-9和Zj2-11鉴定为Bacillusvelezensis,SZS-6鉴定为Burkholderiacepacia。
综上所述,本研究筛选获得6株对柑橘青霉病和绿霉病具有潜在的控制作用的生防细菌菌株,为绿色防控柑橘采后病害积累了资源。