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肝脏纤维化是各种慢性肝病（如病毒性肝炎、酒精及非酒精性脂肪肝炎、胆汁郁积性肝炎等）导致肝脏损伤后向肝硬化发展过程中的一个必经阶段。肝脏纤维化以细胞外基质分泌与降解过程失衡、肝脏内纤维结缔组织异常沉积为特征。在对各种慢性肝病的治疗过程中，肝脏纤维化的治疗是其中重要的一环。而针对这一环节的药物研发目前还存在着极大的市场空缺。 奥贝胆酸(obeticholic acid，OCALIVA，OCA)是近二十年FDA唯一一个批准用于治疗原发性胆汁性肝硬化(Primary biliary cirrhosis，PBC)的小分子化合物，其对于非酒精性脂肪性肝炎的治疗目前处于临床Ⅲ期。临床数据表明，奥贝胆酸可以有效缓解肝脏纤维化。法尼醇X受体(farnesoid X receptor，FXR)是奥贝胆酸的主要靶点。通过激活法尼醇X受体，奥贝胆酸可下调机体肝肠循环内胆酸水平、调节糖脂代谢平衡、抑制胶原沉积、缓解炎症、降低肝门静脉压，进而抑制肝脏纤维化发展。 本课题通过建立分子、细胞、动物三个层次的化合物筛选体系，先后对由奥贝胆酸等报导法尼醇X受体激动剂结构改造而来的163个化合物进行了筛选与评估。 首先，建立了稳定的分子水平AlphaScreen检测体系及细胞水平FXR-luciferase检测体系，对化合物与法尼醇X受体的结合、激动活性进行了定量评估。筛选出了以化合物FL4-14、LXF-37为代表的共计14个化合物。这些化合物均有不亚于阳性化合物的法尼醇X受体结合、激动活性。随后对这14个化合物又进行了维甲酸X受体(retinoidXreceptor，RXR)选择性测试，化合物均未表现RXR激动效应。 肝脏肌成纤维细胞的生成以及细胞外基质的沉积是肝脏纤维化发病进程中最为重要的一环，目前在研的各种肝脏纤维化治疗药物都与细胞外基质沉积抑制直接或间接相关联。而肝脏细胞外基质主要由活化的肝星状细胞分泌。因此，利用人肝星状细胞系LX-2，构建细胞功能检测体系。对与法尼醇X受体激动活性较强的化合物进行了LX-2活化抑制能力的评估。结合LO2细胞毒实验结果，从14个化合物中挑选出7个化合物进入后续的动物水平药效学及药物代谢动力学测试。 利用硫代乙酰胺致肝脏纤维化模型，对化合物FL4-14、15进行药效学初步评价。其中，化合物FL4-14在此模型上表现出不亚于阳性化合物奥贝胆酸的肝脏纤维化治疗效果。且FL4-14组织分布数据表明，口服2小时，化合物在肝脏的浓度远高于血浆浓度，说明化合物对肝脏有一定的靶向作用。 总而言之，利用分子、细胞、动物三个层次的化合物检测评估，得到了具有一定肝脏纤维化治疗潜质的候选化合物FL4-14，对其的进一步评价与结构改造还有待继续开展。期待能最终得到优于奥贝胆酸的肝脏纤维化治疗药物。