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秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans)是一种重要的模式生物,目前已经被广泛应用到生物对各种驱虫剂抗性机制的研究中。福尔马林被普遍用于鱼类寄生虫病的防治中,但是,由于长期的应用,许多寄生虫对它产生了一定的抗药性。本研究将秀丽隐杆线虫接种到含800ppm福尔马林的培养基中,传代培养一个月,应用抑制性差减杂交技术,筛选经福尔马林处理后表达上调的基因,共获得676个克隆。然后,对这些克隆运用斑点杂交技术做进一步筛选,得到表达具有显著差异的161个克隆,最后,对其进行了测序分析。
BLAST分析发现:(1)细胞凋亡相关基因的表达发生上调,这些基因编码包括线粒体呼吸链相关蛋白、含TPR序列的蛋白SGT-1、热休克蛋白、氧化应激相关蛋白、胞吞过程相关蛋白、DNA复制和修复相关蛋白以及其它一些重要的凋亡相关蛋白;(2)编码重要的转录调节因子和信号传导相关蛋白如转录激活因子FosB/c-Fos、G蛋白、细胞周期蛋白B、钙结合蛋白、核小体装配蛋白NAP-1等的基因的表达发生上调;(3)能量代谢和蛋白质、脂肪、氨基酸代谢途径中的有些基因的表达也发生上调。(4)除了以上已知功能的基因外,还有一些未命名蛋白质基因。
这些结果说明福尔马林对秀丽隐杆线虫的影响除了诱导细胞凋亡之外,还伴随着其它细胞代谢活动的改变。本研究为进一步研究生物体对福尔马林的抗性机制奠定了的基础。