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卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposis sarcoma associated herpesvirus，KSHV)是新近发现的人类疱疹病毒，又称为人疱疹病毒8型(Human herpesvirus8，HHV-8)。与其他疱疹病毒一样，KSHV存在两种不同的生活周期，潜伏期和裂解期。其中裂解性复制在病毒的传播和病毒的致病性上发挥着关键性的作用。
KSHV裂解性复制主要依靠病毒自己所编码的多个复制蛋白进行复制。这些蛋白包括DNA聚合酶(DNA polymerase P018)、DNA聚合酶延伸因子(thepolymerase factor PF8)、单链DNA结合蛋白(the single-stranded DNA bindingprotein SSB)、解螺旋引物三聚体(the trivalent helicase-primase complex)、转录激活蛋白(replication transcription activator RTA)、原点结合蛋白(origin bindingprotein OBP)。其中P018和PF8是关键的蛋白， P018的DNA合成活性强烈的依赖PF8，Po18单独存在的条件下只能掺入3个核苷酸，当PF8和Po18同时存在时，Po18能够合成长链的DNA，并且这两个蛋白的相互作用也是特异的，不能被其他的蛋白所取代。因此，这两个蛋白的相互作用以及在KSHV的复制中的作用对阐明裂解性复制的机理和寻找新的抗病毒作用的靶位点至关重要。而蛋白和抗体是开展该项研究最重要的生物材料，表达纯化这两种蛋白和制备相应抗体将为KSHV裂解性复制机制研究创造条件。因此本研究利用KSHV病毒基因组DNA作为模板，通过特异引物PCR获得病毒基因pf8及po18。分别克隆到原核表达载体中，利用大肠杆菌表达系统表达GST融合的病毒蛋白PF8及Po18。通过GST亲和层析、3C蛋白酶切割得到全长的PF8；通过电洗脱方法，我们获得纯化的GST-Po18。以纯化的蛋白免疫大耳白兔，制备了多克隆抗体，该抗体可以识别原核表达的PF8和Po18，BCBL-1细胞中表达的PF8和Po18蛋白。Po18和PF8多抗通过IFA分别检测Po18和PF8蛋白在BCBL-1细胞中的定位，结果显示这两种蛋白定位于细胞核，并呈典型的圆形或肾形点状分布，一般认为其代表了病毒DNA复制的部位。
为了检测PF8的DNA结合活性和在DNA聚合酶催化的DNA合成反应中的延续性，通过EMSA实验证实PF8可以和30bp的双链DNA结合并且发现了两个迁移率改变的条带。在DNA体外合成反应中，以Dig-dUTP代替传统实验中所用的放射性标记的核苷酸，以M13和其相应的引物为模板，同时通过体外转录翻译得到有活性的Pol-8和PF-8作为阳性对照。通过掺入的Dig信号检测到在大肠杆菌表达的PF-8具有很强的DNA聚合酶的延续性。