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禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)广泛分布于世界范围内的家禽（鸡、鹌鹑、家鹅、家鸭等）、野禽（野鸭、野鹅、天鹅等）等禽类。根据AIV对人工感染鸡的致病性不同，可将其分为高致病性禽流感(Highly pathogenic avian influenza Virus，HPAIV)和低致病性禽流感(Low pathogenic avian influenza Virus，LPAIV)，并且跨种传播成为近来年AIV的主要流行趋势。视黄酸诱导基因蛋白1(Retinoic acid-inducible gene1，RIG-Ⅰ)是先天性免疫系统的重要组成部分，许多研究表明RIG-Ⅰ在人和哺乳动物的抗流感过程中起着重要作用，然而有关禽类RIG-Ⅰ的研究数据有限。一些研究发现鸭科动物有RIG-Ⅰ基因而鸡缺失，推测这可能是鸡和鸭感染AIV后表现差异明显的主要原因之一。鸭为什么对AIV有相对较强的抵抗力？针对这个问题，本研究首先扩增了野生绿头鸭RIG-Ⅰ基因的全长，并分析其在各组织中的表达与分布;然后以SPF鸭（绍兴麻鸭）为模式动物，人工接种不同毒力AIV，探究脾脏RIG-Ⅰ通路中各先天性免疫因子随时间变化的规律，以及RIG-Ⅰ通路在鸭科动物抗AIV中的作用及其分子机制，以期为人类防控AIV提供理论和现实指导依据。
1、经禽流感病毒、新城疫病毒、大肠杆菌、沙门氏菌等病原的初步筛查，选取健康状况较好的野生绿头鸭样本采集心、肝、脾、肺、肾、十二指肠，经普通RT-PCR扩增野鸭RIG-Ⅰ基因(MdRIG-Ⅰ)，并进行生物信息学分析;再运用荧光定量RT-PCR检测其在各组织脏器中的相对表达水平。
结果显示：MdRIG-Ⅰ基因的CDS序列，全长2802bp，编码933个氨基酸，具有较强的种间特异性，蛋白质结构典型，各部位之间mRNA的表达量各不相同，在肝脏中表达水平最高，其次是十二指肠，在心和脾中表达，在肺和肾低表达。
2、90只4周龄的SPF鸭（绍兴麻鸭）分为3组，以滴鼻、口咽的方式分别接种PBS、LPAIV H4N6和HPAIV H5N8，在接种后的6h、1d、2d、3d、5d、7d、10d、14d，每组随机选取3只鸭子安乐死后采集脾脏，并提取其总RNA，采用荧光定量RT-PCR检测RIG-Ⅰ通路中的关键先天性免疫因子RIG-Ⅰ、IPS-1、IKK-β、NF-κB、TBK-1、IFN-β、IL-8的相对表达量。
结果：显示：H4N6在SPF鸭（绍兴麻鸭）的脾脏中会诱发先天性免疫因子的多个表达高峰，第一次是在6h-2d，第二次是在5d-10d，在10d-14d会表现出一个上升的趋势，是下一个高峰的前兆;H5N8在SPF鸭（绍兴麻鸭）的脾脏中会诱导比较明显两个表达高峰，第一个表达高峰通常在6h-2d/3d，在5d/7d-14d会诱导一个不断上升的高表达。二者皆在2d/3d-5d/7d出现一个表达的低谷。先天性免疫因子RIG-Ⅰ、IPS-1、IKK-β、NF-κB、TBK-1、IFN-β、IL-8均参与了RIG-Ⅰ通路介导的抗流感反应，且相互之间高度相关。并且，SPF鸭（绍兴麻鸭）感染AIV后的10d-14d，HPAIV H5N8相较于LPAIV H4N6能诱导更高水平的先天性免疫反应。
总之，本研究成功克隆了绿头鸭RIG-Ⅰ基因，并且SPF鸭（绍兴麻鸭）无论是感染LPAIV H4N6还是HPAIV H5N8，都能通过RIG-Ⅰ信号通路诱发机体的先天免疫反应而发挥抗AIV的重要作用，为禽类先天性免疫的研究以及人类防控AIV提供了理论和现实指导依据。
1、经禽流感病毒、新城疫病毒、大肠杆菌、沙门氏菌等病原的初步筛查，选取健康状况较好的野生绿头鸭样本采集心、肝、脾、肺、肾、十二指肠，经普通RT-PCR扩增野鸭RIG-Ⅰ基因(MdRIG-Ⅰ)，并进行生物信息学分析;再运用荧光定量RT-PCR检测其在各组织脏器中的相对表达水平。
结果显示：MdRIG-Ⅰ基因的CDS序列，全长2802bp，编码933个氨基酸，具有较强的种间特异性，蛋白质结构典型，各部位之间mRNA的表达量各不相同，在肝脏中表达水平最高，其次是十二指肠，在心和脾中表达，在肺和肾低表达。
2、90只4周龄的SPF鸭（绍兴麻鸭）分为3组，以滴鼻、口咽的方式分别接种PBS、LPAIV H4N6和HPAIV H5N8，在接种后的6h、1d、2d、3d、5d、7d、10d、14d，每组随机选取3只鸭子安乐死后采集脾脏，并提取其总RNA，采用荧光定量RT-PCR检测RIG-Ⅰ通路中的关键先天性免疫因子RIG-Ⅰ、IPS-1、IKK-β、NF-κB、TBK-1、IFN-β、IL-8的相对表达量。
结果：显示：H4N6在SPF鸭（绍兴麻鸭）的脾脏中会诱发先天性免疫因子的多个表达高峰，第一次是在6h-2d，第二次是在5d-10d，在10d-14d会表现出一个上升的趋势，是下一个高峰的前兆;H5N8在SPF鸭（绍兴麻鸭）的脾脏中会诱导比较明显两个表达高峰，第一个表达高峰通常在6h-2d/3d，在5d/7d-14d会诱导一个不断上升的高表达。二者皆在2d/3d-5d/7d出现一个表达的低谷。先天性免疫因子RIG-Ⅰ、IPS-1、IKK-β、NF-κB、TBK-1、IFN-β、IL-8均参与了RIG-Ⅰ通路介导的抗流感反应，且相互之间高度相关。并且，SPF鸭（绍兴麻鸭）感染AIV后的10d-14d，HPAIV H5N8相较于LPAIV H4N6能诱导更高水平的先天性免疫反应。
总之，本研究成功克隆了绿头鸭RIG-Ⅰ基因，并且SPF鸭（绍兴麻鸭）无论是感染LPAIV H4N6还是HPAIV H5N8，都能通过RIG-Ⅰ信号通路诱发机体的先天免疫反应而发挥抗AIV的重要作用，为禽类先天性免疫的研究以及人类防控AIV提供了理论和现实指导依据。