八珍汤对荷结肠癌小鼠血清及癌组织中miRNA-21和miRNA-92a表达的影响

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:paulhujq
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目的:观察八珍汤对荷瘤小鼠结肠癌皮下种植瘤生长、血清及癌组织中miRNA-92a和miRNA-21表达的影响,探讨八珍汤抑制皮下种植瘤生长的机制。
  方法:给予正常荷瘤小鼠建立结肠癌皮下种植瘤模型,通过观察荷瘤小鼠生长状态、病理形态,采用实时定量PCR法检测八珍汤干预后荷瘤小鼠血清及癌组织中miRNA-92a和miRNA-21表达的变化。利用SPSS22.0统计软件包进行统计分析,从抑瘤率、分子水平和蛋白水平探讨八珍汤抑制皮下种植瘤生长的机制。
  结果:1.荷瘤小鼠的生长状态:空白组的裸鼠生长状态最好,八珍汤组稍强于模型组。2.荷瘤小鼠存活率的比对:本次实验期间无空白组裸鼠死亡,存活率为100%。模型组中死亡裸鼠4只,存活率为90%,死亡率为10%;八珍汤组死亡裸鼠2只,存活率为95%,死亡率为5%。3.荷瘤小鼠成功造模率:模型组存活裸鼠36只,成功造模33只,造模成功率为91.7%;八珍汤组存活裸鼠38只,成功造模34只,造模成功率为94.7%。4.对比模型组与八珍汤组肿瘤的大小:根据随机选取的30只裸鼠的肿瘤测得结果显示,模型组与八珍汤组肿瘤的大小具有明显差异存在,模型组裸鼠肿瘤生长速度随着造模后天数的增加,生长速度也增加的更快,八珍汤组的裸鼠肿瘤生长速度明显较模型组减慢。5.八珍汤组对皮下种植瘤的抑瘤率:根据随机表原则,选取30只裸鼠,根据所测得肿瘤大小及体积,可以计算出八珍汤的抑瘤率为56.49%。6.病理切片及miRNA-92a、miRNA-21的表达水平的差异:HE染色切片观察,模型组明显可见细胞走行顺序紊乱,排列不规则,胞核多染为深蓝色,中间部分染色较边缘处较深,多见细胞核分裂相,胞浆多染为红色,对比正常细胞其异型性较多,细胞多聚集且易连成串,偶有结节形成。八珍汤组同样可见蓝色深染的报核以及红色胞浆,核分裂相较模型组少见,较模型组相比走行较为整齐,排列致密规则,较模型组细胞异型性小,细胞分布较为分散,结节形成不明显。miRNA-92a、miRNA-21在模型组的血清及组织中表达水平最高,八珍汤组次之,空白组的表达水平最低。
  结论:1.在裸鼠试验中,使用八珍汤组方可以抑制肿瘤的生长,减少结肠癌的复发和转移,降低肿瘤的大小体积。2.miRNA-92a、miRNA-21的表达水平与肿瘤的进展有关,随着病情的加重其表达水平升高,八珍汤组中miRNA-92a、miRNA-21的平均表达水平较模型组降低,说明八珍汤具有抑制肿瘤生长的作用。3.与八珍汤组裸鼠相比,模型组裸鼠其生长状态较差,肿瘤体积较大,裸鼠的形体偏小。4.本次研究中发现,八珍汤组方可以通过降低miRNA-92a、miRNA-21表达水平来抑制肿瘤的生长,但是其中的机制仍有待于进一步研究。
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