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目的：建立大鼠胫骨中段闭合折骨髓内克氏针固定骨折模型，观察活血化瘀汤对SD大鼠骨折愈合过程中局部转化生长因子β<,1>(transforming growth factor-β<,1>,TGF-β<,1>)mRNA、蛋白表达，及血清Ⅰ型胶原、骨钙素表达影响，石蜡切片、透射电镜、X光片、抗折力试验观察骨折愈合情况，探讨活血化瘀汤对大鼠骨折愈合过程中软骨内成骨机制的影响。
方法：采用体重280±30g、雄性SD大鼠99只，建立大鼠胫骨中段闭合折骨髓内克氏针固定骨折模型，将84只造模成功大鼠随机分成活血化瘀汤组和生理盐水组，6只正常大鼠设为正常对照组,麻醉苏醒后开始分别灌服中药和生理盐水，正常对照组灌服生理盐水。于造模后3d、5d、7d、14d、21d、28d、35d时间点在麻醉下，腹主动脉取血，检测血清Ⅰ型胶原、骨钙素的表达：同时取骨折区组织行石蜡切片、透射电镜观察，应用RT-PCR(反转录一聚合酶链反应)、Elisa(酶联免疫吸附法)等技术检测TGF-β<,1> mRNA、蛋白的表达。
结果：活血化瘀汤能促进骨折SD大鼠Ⅰ型胶原、骨钙素、TGF-β<,1>mRNA及蛋白的表达。SD大鼠血清Ⅰ型胶原3d时开始表达增强，7d时表达减弱，达到低谷(高于正常值)，然后表达逐渐增强，21d时达到高峰．此后表达量逐渐降低，35d时,基本降至正常值范围：两组的表达趋势一致。而中药组表达量始终较对照组高，5d、7d、14d、21d差异非常显著(p<0.01)：3d、28d、35d无显著性差异(p>0.05)，血清骨钙素的表达与Ⅰ型胶原的表达基本一致。SD大鼠骨痂TGF-β<,1> mRNA的表达3d时达到第一个峰值．随后表达量逐渐降低，7d时达到一个低谷，然后表达逐渐增强，14d时达到第二个峰值亦是表达最高点，随后表达逐渐减弱；28d以后未检测到TGF-β<,1> ，mIRNAa的表达，两组的表达趋势一致。5d、7d对照组较中药组表达增强，差异非常显著(p<0.01)；3d、14d中药组较对照组表达增强，差异非常显著(p<0.01)：21d中药组较对照组表达增强，差异显著(p<0.05)，TGF-β<,1> mMRNA与蛋白的表达具有一致性。活血化瘀汤能缩短骨折愈合、塑形时间，提高骨折愈合质量。
结论：
1、大鼠胫骨中段闭合折骨髓内克氏针固定骨折模型稳定，可操作性强，重复性好。
2、活血化瘀汤能通过促进骨折大鼠Ⅰ型胶原、骨钙素、TGF-β<,1> mRNA及蛋白的表达，促进软骨内成骨。
3、活血化瘀汤能缩短骨折愈合、塑形时间，提高骨折愈合的质量。
4、TGF-β<,1> 是骨折愈合过程中软骨内成骨的标志性因子。
5、在骨折早期中药组TGF-β<,1> mRNA及蛋白表达较对照组表达反而减少,其原因可能是：活血化瘀汤影响了Ihh/甲状旁腺素相关肽信号系统、TGF-β/BMPs间的信号传导、TGF-β<,1>与其受体结合的数量。