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目的：杜仲作为补虚药，具有补肝肾，强筋骨的功效，用于治疗骨质疏松的作用已被证实，而杜仲的炮制品焦杜仲在治疗骨质疏松方面与生杜仲的药效差异尚未见报道；杜仲与续断常相须而用，杜仲的不同炮制品分别配伍续断在抗骨质疏松方面的药效差异也无相关报道。炎症因子是参与骨质疏松发病的主要因素之一，成骨细胞作为骨代谢中的核心细胞，其骨形成的功能对保持骨量至关重要。故本研究通过体内外实验探讨生杜仲与焦杜仲及其分别与续断配伍对成骨细胞的作用及对脂多糖诱导小鼠炎性骨质疏松模型的药效对比，旨在比较生杜仲与焦杜仲在治疗骨质疏松方面的差异性，为今后临床用药及组方提供实验数据。
方法：⑴体外实验：提取乳鼠颅骨的原代成骨细胞，通过“多次贴壁”法换液及传代纯化成骨细胞，培养至第3-5代时，取形态优益、生长良好的细胞计数后分别铺于细胞培养板中，贴壁后分别给予不同浓度的生杜仲、焦杜仲、生杜仲-续断和焦杜仲-续断溶液，通过MTT法检测成骨细胞活力，AKP法检测成骨细胞碱性磷酸酶的表达，EDU法检测成骨细胞的增殖，茜素红染色法检测成骨细胞的矿化能力。⑵体内实验：通过脂多糖诱导小鼠炎症骨质疏松模型，分别给予灌服生杜仲、焦杜仲、生杜仲-续断和焦杜仲-续断溶液，3周后提取小鼠血清及骨组织，行骨组织切片检测骨质的变化，采用碱性磷酸酶试剂盒检测小鼠血清AKP的活性，抗酒石酸酸性磷酸酶试剂盒检测血清中酸性磷酸酶活性，白介素-6ELISA试剂盒检测血清中白介素-6的含量。
结果：⑴体外实验：生杜仲、焦杜仲及生杜仲-续断、焦杜仲-续断溶液在一定浓度内均可促进成骨细胞活力、碱性磷酸酶表达、增殖及矿化作用。通过药物间对比，焦杜仲浓度在1.56mg/mL时和焦杜仲-续断浓度在0.78、1.56mg/mL时对成骨细胞的活力影响高于同浓度的生杜仲及生杜仲-续断溶液；焦杜仲浓度在0.78、1.56mg/mL时和焦杜仲-续断浓度在1.56mg/mL时对OB碱性磷酸酶的表达比明显高于同浓度的生杜仲及生杜仲-续断溶液；焦杜仲及焦杜仲-续断浓度在0.78mg/mL时对OB的增殖作用均高于同浓度的生杜仲及生杜仲-续断溶液；焦杜仲及焦杜仲-续断溶液浓度在0.78、1.56mg/mL时对OB矿化作用均高于同浓度的生杜仲及生杜仲-续断溶液。⑵体内实验：给药组小鼠体重、骨小梁数量、血清AKP活性均高于模型组，给药组小鼠血清IL-6含量均低于模型组，生杜仲-续断及焦杜仲-续断组小鼠血清StrACP活性均低于模型组。通过药物间对比，生杜仲与焦杜仲组、生杜仲-续断和焦杜仲-续断组对小鼠体重及血清中StrACP活性的差异无统计意义；焦杜仲与焦杜仲-续断组小鼠骨小梁数量、血清AKP活力高于生杜仲及生杜仲-续断组；焦杜仲与焦杜仲-续断组小鼠血清IL-6含量低于生杜仲及生杜仲-续断组。
结论：焦杜仲在抗骨质疏松方面的作用优于生杜仲，证实生杜仲经过盐浸炒焦炮制成焦杜仲后在抗骨质疏松方面的作用增加。
方法：⑴体外实验：提取乳鼠颅骨的原代成骨细胞，通过“多次贴壁”法换液及传代纯化成骨细胞，培养至第3-5代时，取形态优益、生长良好的细胞计数后分别铺于细胞培养板中，贴壁后分别给予不同浓度的生杜仲、焦杜仲、生杜仲-续断和焦杜仲-续断溶液，通过MTT法检测成骨细胞活力，AKP法检测成骨细胞碱性磷酸酶的表达，EDU法检测成骨细胞的增殖，茜素红染色法检测成骨细胞的矿化能力。⑵体内实验：通过脂多糖诱导小鼠炎症骨质疏松模型，分别给予灌服生杜仲、焦杜仲、生杜仲-续断和焦杜仲-续断溶液，3周后提取小鼠血清及骨组织，行骨组织切片检测骨质的变化，采用碱性磷酸酶试剂盒检测小鼠血清AKP的活性，抗酒石酸酸性磷酸酶试剂盒检测血清中酸性磷酸酶活性，白介素-6ELISA试剂盒检测血清中白介素-6的含量。
结果：⑴体外实验：生杜仲、焦杜仲及生杜仲-续断、焦杜仲-续断溶液在一定浓度内均可促进成骨细胞活力、碱性磷酸酶表达、增殖及矿化作用。通过药物间对比，焦杜仲浓度在1.56mg/mL时和焦杜仲-续断浓度在0.78、1.56mg/mL时对成骨细胞的活力影响高于同浓度的生杜仲及生杜仲-续断溶液；焦杜仲浓度在0.78、1.56mg/mL时和焦杜仲-续断浓度在1.56mg/mL时对OB碱性磷酸酶的表达比明显高于同浓度的生杜仲及生杜仲-续断溶液；焦杜仲及焦杜仲-续断浓度在0.78mg/mL时对OB的增殖作用均高于同浓度的生杜仲及生杜仲-续断溶液；焦杜仲及焦杜仲-续断溶液浓度在0.78、1.56mg/mL时对OB矿化作用均高于同浓度的生杜仲及生杜仲-续断溶液。⑵体内实验：给药组小鼠体重、骨小梁数量、血清AKP活性均高于模型组，给药组小鼠血清IL-6含量均低于模型组，生杜仲-续断及焦杜仲-续断组小鼠血清StrACP活性均低于模型组。通过药物间对比，生杜仲与焦杜仲组、生杜仲-续断和焦杜仲-续断组对小鼠体重及血清中StrACP活性的差异无统计意义；焦杜仲与焦杜仲-续断组小鼠骨小梁数量、血清AKP活力高于生杜仲及生杜仲-续断组；焦杜仲与焦杜仲-续断组小鼠血清IL-6含量低于生杜仲及生杜仲-续断组。
结论：焦杜仲在抗骨质疏松方面的作用优于生杜仲，证实生杜仲经过盐浸炒焦炮制成焦杜仲后在抗骨质疏松方面的作用增加。