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目的：研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在急性白血病细胞内的表达及意义，探讨其与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达及血管生成之间的关系。
方法：(1)应用改良的乙二醇甲基丙烯酸酯(GMA)塑料包埋法进行骨髓活检组织制片，免疫标记采用EnVision免疫组化二步法，检测25例初诊、3例复发急性白血病、17例完全缓解及10例对照骨髓组织中HIF-1α、VEGF蛋白表达水平以及骨髓内微血管密度(MVD)。(2)采用逆转录多聚酶链式反应(RT—PCR)方法半定量检测其中8例初诊、2例复发急性白血病、8例完全缓解及6例对照骨髓单个核细胞中HIF-1αmRNA表达水平。
结果：(1)骨髓活检组织应用改良的塑料包埋法制片，免疫标记HIF-1α、VEGF及血管内皮细胞，阳性表达定位准确，清晰，且无明显背景着色。(2)28例初诊及复发急性白血病骨髓组织内HIF-1α蛋白低、中等、较高、高表达水平分别为1、10、8、9例，较完全缓解组及对照组表达水平明显增高(P＜0.05)。HIF-1α蛋白表达水平在急性髓细胞白血病(AML)与急性淋巴细胞白血病(ALL)间、完全缓解组与对照组间均无显著性差异。(3)HIF-1αmRNA在急性白血病及对照组骨髓内单个核细胞中均有表达，半定量检测mRNA表达水平以HIF-1α/β-actin表示。初诊及复发急性白血病骨髓内单个核细胞HIF-1αmRNA表达水平为0.74±0.16，与对照组及完全缓解组无明显差异。(4)初诊及复发急性白血病骨髓组织内VEGF蛋白表达阳性率为46％，其中AML骨髓组织内VEGF蛋白表达较ALL明显增高(P＜0.05)，ALL骨髓组织内VEGF蛋白表达与对照组及完全缓解组无统计学差异。(5)初诊及复发急性白血病骨髓内MVD为8.32±3.83/40×HPF，与完全缓解组5.53±2.18/40×HPF及对照组4.71±2.16/40×HPF比较具有统计学差异(P＜0.05)。MVD在AML与ALL间、完全缓解组与对照组间均无显著性差异。(6)初诊及复发急性白血病骨髓组织中HIF-1α蛋白表达水平、MVD与患者年龄、外周血白细胞、血红蛋白、血小板计数及骨髓内原始幼稚细胞数均无明显相关性。初诊及复发AML骨髓组织中HIF-1α蛋白表达水平与VEGF蛋白表达及MVD之间具有相关性(r=0.47，r=0.61，P＜0.05)，VEGF蛋白表达与MVD呈正相关(r=0.67，P＜0.05)。ALL骨髓内HIF-1α蛋白表达水平与VEGF表达及MVD之间无相关性。
结论：(1)骨髓活检组织采用改良的GMA塑料包埋法可成功进行抗体免疫组织化学标记。(2)HIF-1α蛋白表达水平、MVD在初诊及复发急性白血病骨髓组织内较完全缓解组及对照组明显增高，提示HIF-1α蛋白及血管生成可能在急性白血病发生发展中发挥重要作用。(3)初诊及复发AML骨髓组织中HIF-1α蛋白表达水平与VEGF表达及MVD具有相关性，表明AML细胞内HIF-1α蛋白可通过调控VEGF的转录与表达，对骨髓组织内血管生成中起一定的调节作用。