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背景与目的：
原发性肝癌(Primary hepatocellular carcinoma，PHC)是我国最常见的恶性肿瘤之一，起病隐匿，早期缺乏典型的症状，有临床症状的患者病情多已进入中晚期，错过手术治疗时机，死亡率高。由于我国是肝癌大国，提高肝癌的早期诊断水平，及时发现高危人群，争取肝癌的早诊断、早治疗，有助于提高肝癌患者的生存时间和生活质量，降低医疗费用。目前，临床上常用的早期肝癌的筛查方法是检测血浆中的甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein，AFP)联合影像学检查方法例如彩超、CT、MRI等，但是对于直径较小者，影像学检查并不能发现明确病灶，易造成漏诊。迄今为止，甲胎蛋白仍然是目前临床上最常用的诊断肝癌的特异性血清标志物，广泛用于肝癌的普查、诊断、评估治疗效果及预测复发；在排除妊娠和生殖腺胚胎瘤的基础上，AFP大于400ng/ml作为诊断肝癌的条件之一。但值得重视的是，AFP筛查肝癌时，约有30～40%的假阴性率。美国肝病学会2011年公布的指南已不推荐AFP作为肝癌筛查的血清学指标。因此，寻找新的血清诊断标志物来提高早期肝癌的诊断正确率非常重要。
Rap2a是小分子量GTP结合蛋白的原癌基因Ras超家族的成员之一，在人类的多种细胞中起着复杂的生物学功能如细胞的增殖、信号转导、迁移和侵袭等。在本课题组的前期研究中，已应用基因芯片技术筛选出肝癌的差异基因表达谱，从中发现Rap2a基因在肝癌组织中呈上调表达。目前，有关血浆Rap2a在肝癌的诊断中的价值尚未见有文献报道。本研究采用ELISA技术，检测肝癌患者血浆中Rap2a蛋白的浓度，探讨Rap2a对肝癌的诊断价值。
资料与方法：
1.收集41例肝癌患者(肝癌组)、28例肝硬化患者(肝硬化组)、30例健康体检者(正常组)的外周静脉血，并记录其临床病理资料包括年龄、性别、肿瘤直径大小、HBV感染状态、是否门静脉血管侵犯、是否远处转移及TNM分期。
2.应用ELISA方法检测血浆中的Rap2a蛋白及甲胎蛋白浓度水平。
3.采用SPSS21.0统计学软件进行数据分析，Rap2a和AFP的蛋白浓度以中位数(四分位数间距)，即M(Q1,Q3)来表示；组间比较采用Mann-Whitney或Kruskal-Wallis检验；Rap2a和AFP相关性分析采用非参数Spearman检验；绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析Rap2a和AFP诊断肝癌时的敏感度和特异度，评估其在肝癌诊断中的价值；以P<0.05代表差异有统计学意义。
结果：
1.血浆Rap2a蛋白在肝癌组的表达水平[118.57(73.99, 153.44)ng/ml]明显高于肝硬化组[64.73(34.54, 75.86)ng/ml]和正常组[17.63(8.94, 24.53)ng/ml](P＜0.05)。
2.Rap2a蛋白的表达水平与AFP水平无直线相关性(r=-0.258,P=0.103)。
3.肝癌患者血浆Rap2a蛋白在TNM分期Ⅲ、Ⅳ期[139.94(80.32, 230.52)ng/ml]及有远处转移者[167.16(107.29, 399.56)ng/ml]明显高于Ⅰ、Ⅱ期[104.57(36.41,131.27)ng/ml]及无远处转移[103.07(42.46,131.27)ng/ml](P＜0.05)；不同年龄、性别、肿瘤大小、HBV感染状态及有无门静脉血管侵犯患者血浆Rap2a蛋白水平差异均无统计学意义(P＞0.05)。
4.血浆Rap2a诊断肝癌时的AUC为0.868(95%CI:0.784~0.952)，高于AFP的AUC(0.783)，灵敏度为83.6％，特异度为78.3%；Rap2a与AFP联合时的AUC为0.985，高于Rap2a或AFP单独诊断，差异有统计学意义(P＜0.01)。
结论：
1.Rap2a蛋白在肝癌组的血浆中呈高表达，明显高于肝硬化组及正常组，表明Rap2a可能参与了肝癌的发生发展过程，并有可能成为肝癌新的血清诊断学标志物。
2.Rap2a的表达水平与是否转移、TNM分期有关，提示Rap2a可能与肝癌侵袭和转移的发生有关，可有助于评估肝癌的风险及预后。
3.Rap2a与AFP无直线相关性，AFP阴性肝癌患者的Rap2a可能呈现阳性，对AFP阴性肝癌的诊断有重要意义。
4.Rap2a与AFP联合检测肝癌时灵敏度可提高至95.1%，证明Rap2a与AFP联合检测可提高肝癌的诊断正确率。
原发性肝癌(Primary hepatocellular carcinoma，PHC)是我国最常见的恶性肿瘤之一，起病隐匿，早期缺乏典型的症状，有临床症状的患者病情多已进入中晚期，错过手术治疗时机，死亡率高。由于我国是肝癌大国，提高肝癌的早期诊断水平，及时发现高危人群，争取肝癌的早诊断、早治疗，有助于提高肝癌患者的生存时间和生活质量，降低医疗费用。目前，临床上常用的早期肝癌的筛查方法是检测血浆中的甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein，AFP)联合影像学检查方法例如彩超、CT、MRI等，但是对于直径较小者，影像学检查并不能发现明确病灶，易造成漏诊。迄今为止，甲胎蛋白仍然是目前临床上最常用的诊断肝癌的特异性血清标志物，广泛用于肝癌的普查、诊断、评估治疗效果及预测复发；在排除妊娠和生殖腺胚胎瘤的基础上，AFP大于400ng/ml作为诊断肝癌的条件之一。但值得重视的是，AFP筛查肝癌时，约有30～40%的假阴性率。美国肝病学会2011年公布的指南已不推荐AFP作为肝癌筛查的血清学指标。因此，寻找新的血清诊断标志物来提高早期肝癌的诊断正确率非常重要。
Rap2a是小分子量GTP结合蛋白的原癌基因Ras超家族的成员之一，在人类的多种细胞中起着复杂的生物学功能如细胞的增殖、信号转导、迁移和侵袭等。在本课题组的前期研究中，已应用基因芯片技术筛选出肝癌的差异基因表达谱，从中发现Rap2a基因在肝癌组织中呈上调表达。目前，有关血浆Rap2a在肝癌的诊断中的价值尚未见有文献报道。本研究采用ELISA技术，检测肝癌患者血浆中Rap2a蛋白的浓度，探讨Rap2a对肝癌的诊断价值。
资料与方法：
1.收集41例肝癌患者(肝癌组)、28例肝硬化患者(肝硬化组)、30例健康体检者(正常组)的外周静脉血，并记录其临床病理资料包括年龄、性别、肿瘤直径大小、HBV感染状态、是否门静脉血管侵犯、是否远处转移及TNM分期。
2.应用ELISA方法检测血浆中的Rap2a蛋白及甲胎蛋白浓度水平。
3.采用SPSS21.0统计学软件进行数据分析，Rap2a和AFP的蛋白浓度以中位数(四分位数间距)，即M(Q1,Q3)来表示；组间比较采用Mann-Whitney或Kruskal-Wallis检验；Rap2a和AFP相关性分析采用非参数Spearman检验；绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析Rap2a和AFP诊断肝癌时的敏感度和特异度，评估其在肝癌诊断中的价值；以P<0.05代表差异有统计学意义。
结果：
1.血浆Rap2a蛋白在肝癌组的表达水平[118.57(73.99, 153.44)ng/ml]明显高于肝硬化组[64.73(34.54, 75.86)ng/ml]和正常组[17.63(8.94, 24.53)ng/ml](P＜0.05)。
2.Rap2a蛋白的表达水平与AFP水平无直线相关性(r=-0.258,P=0.103)。
3.肝癌患者血浆Rap2a蛋白在TNM分期Ⅲ、Ⅳ期[139.94(80.32, 230.52)ng/ml]及有远处转移者[167.16(107.29, 399.56)ng/ml]明显高于Ⅰ、Ⅱ期[104.57(36.41,131.27)ng/ml]及无远处转移[103.07(42.46,131.27)ng/ml](P＜0.05)；不同年龄、性别、肿瘤大小、HBV感染状态及有无门静脉血管侵犯患者血浆Rap2a蛋白水平差异均无统计学意义(P＞0.05)。
4.血浆Rap2a诊断肝癌时的AUC为0.868(95%CI:0.784~0.952)，高于AFP的AUC(0.783)，灵敏度为83.6％，特异度为78.3%；Rap2a与AFP联合时的AUC为0.985，高于Rap2a或AFP单独诊断，差异有统计学意义(P＜0.01)。
结论：
1.Rap2a蛋白在肝癌组的血浆中呈高表达，明显高于肝硬化组及正常组，表明Rap2a可能参与了肝癌的发生发展过程，并有可能成为肝癌新的血清诊断学标志物。
2.Rap2a的表达水平与是否转移、TNM分期有关，提示Rap2a可能与肝癌侵袭和转移的发生有关，可有助于评估肝癌的风险及预后。
3.Rap2a与AFP无直线相关性，AFP阴性肝癌患者的Rap2a可能呈现阳性，对AFP阴性肝癌的诊断有重要意义。
4.Rap2a与AFP联合检测肝癌时灵敏度可提高至95.1%，证明Rap2a与AFP联合检测可提高肝癌的诊断正确率。