花菜Or基因启动子的研究

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花菜Or突变体的很多组织如花菜头和分生组织积累大量β-胡萝卜素,呈现桔黄色。Or突变体为我们研究类胡萝卜素的代谢途径和调控机制,进而改善作物品质提供理论依据。花菜Dr突变体中类胡萝卜素的大量积累,可能与突变体中前质体或者无色的质体分化成有色体有关,而有色体的形成为类胡萝卜素的积累提供了代谢库。   本研究分析了花菜Or启动子的组织表达特异性和光调控性。首先,构建不同启动子片段驱动GUS基因的载体,并转化植物获得转基因拟南芥。通过GUS染色,证明了Or基因在幼嫩叶片、荚果、花瓣和叶腋中等组织中表达。花菜Dr转录起始位点上游224到354之间的130bp足以启动Dr基因的组织表达特异性a最后,qPCR证明花菜Dr启动子调控下GUS基因在转录水平受光调控,并且在见光后第三个小时GUS转录本达到最高峰。酵母单杂交证明花菜Or启动子中含有光调控元件的150bp[-150到-300)可以和HY5蛋白结合。分析植物OR同源蛋白的进化关系,拟南芥At5g61670与花菜Or基因的亲缘关系最接近。根据Genevestigator分析和qPCR实验,证明拟南芥Or同源基因At5g61670的时空表达与花菜Or相似。
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