肌苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤细胞色素c和caspase-3表达的影响

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目的:研究肌苷对新生大鼠HIBDCytc和caspase-3表达的影响,探讨肌苷对HIBD保护作用及可能机制。方法:48只7日龄SD大鼠分为假手术组、HIBD组和肌苷治疗组,后两组参照Rice方法建立HIBD模型,肌苷组自模型建立即刻开始腹腔注射肌苷100mg/kg,每天两次,HIBD组注射等剂量的生理盐水,假手术组仅分离左颈总动脉而不结扎,不予缺氧,不注射任何药物,3天时各组随机取4只对左侧大脑进行尼氏染色;7天时各组随机取10只测定实验各组左/右脑比重及体重增长率。另取90只7日龄SD大鼠按上述方法分组给药,采用westernblot法测定各组在6h、12h、24h、3d、7d左侧大脑皮质细胞色素C和caspase-3的蛋白表达。结果:1.HIBD组较假手术组体重增长缓慢,差异有显著性(P<0.05)。2.肌苷治疗组能改善左/右脑比重,与HIBD组比较,差异显著(P<0.05)。3.HI后Cytc的蛋白表达在6h未见表达,12h开始出现表达,假手术组、肌苷组、HIBD组在HI后12小时相对密度值分别为(1.027±0.0682,1.664±0.0675,1.389±0.0093),24小时相对密度值分别为(0.954±0.0223,2.178±0.0579,1.332±0.0211)3d相对密度值分别为(1.073±0.0100,1.999±0.0240,1.212±0.0122),7d相对密度值分别为(0.958±0.0390,1.585±0.0238,1.136±0.0112),三者之间两两比较差异均有显著性(P<0.05)。4.HI后caspase-3在6h开始出现裂解片段,7天仍见少量表达,假手术组在任何时候未见caspase-3的裂解片段的表达,假手术组、肌苷组、HIBD组在HI工后6小时相对密度值分别为(0,0.601±0.0090,0.3924±0.0160);12小时相对密度值分别为(0,0.961±0.0154,0.486±0.0137);24小时相对密度值分别为(0,1.107±0.0035,0.572±0.0064);3d相对密度值分别为(0,0.765±0.0189,0.250±0.0112);7d相对密度值分别为(0,0.475±0.0164,0.013±0.0021);肌苷治疗组与HIBD组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:肌苷能减少新生大鼠HIBD Cytc和caspase-3的表达,可能通过抑制细胞凋亡途径减轻缺氧缺血性脑损伤,对HIBD具有一定的保护作用。
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