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茶多酚(Tea Polyphenols，TP)，又名茶单宁，是茶叶中多酚类物质的总称。其中儿茶素类化合物为茶多酚的主体成分，约占总量的65％-80％。儿茶素主要成分为表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)。有研究表明，TP能够作为新型的天然抗氧化剂，同时兼有较强的抗炎和抑制免疫炎症反应的作用，具有增强机体抵抗力、抗肿瘤、抗氧化、防癌、抑菌、抗辐射、降血糖和血脂、预防心血管疾病、抗衰老等药理作用。银杏叶为银杏的干燥叶，其提取物(Ginkgo biloba extract，GBE)具有抗氧化、清除和抑制氧自由基、抗菌消炎、抗病毒等药理作用。随着药理作用机制的深入研究和药物提取工艺标准化的提出，这两种药物在口腔医学领域中也得到越来越广泛的应用，但其对牙周病的治疗机理尚不明确。人牙周膜细胞(Periodental ligament cells，PDLCs)是牙周膜中起重要作用的功能细胞，能够合成胶原，参与牙周组织的新陈代谢，是牙周组织中新细胞发生的主要来源。
目的：通过观察TP在脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)介导下单独和与GBE联合应用对体外培养人PDLCs增殖的影响以及TP对PDLCs分泌细胞因子的影响，研究TP和GBE对PDLCs的保护作用，初步探讨TP在慢性牙周病治疗中的作用机理，为将来在牙周病治疗方面开发和利用TP等药物提供理论依据和实验基础。
方法：1.通过改良组织块培养法体外培养第5代人PDLCs，免疫组化鉴定细胞来源，苏木精-伊红(Haematoxylin-eosine stain，HE)染色法观察细胞形态。2.用LPS刺激PDLCs，采用磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B，SRB)比色法观察各浓度梯度下的TP和TP与GBE联合应用对PDLCs的增殖和对LPS的抑制作用。3.酶联免疫吸附试验检测法观察不同浓度TP对LPS介导下人PDLCs分泌白细胞介素6(Interleukin-6，IL-6)、白细胞介素1β(Interleukin-1β，IL-1β)、肿瘤坏死因子α(Tumornecrosis factor alpha，TNF-α)水平的影响。
结果：
1.通过体外原代培养的牙周膜，在第十天左右可见组织块周围有梭形细胞游出。经免疫组化鉴定：抗波形丝蛋白(VIM)阳性，抗细胞角蛋白(CK)阴性。
2.LPS在浓度为100μg/ml时明显抑制细胞活性，200μg/ml的TP组对LPS抑制PDLCs增殖活性有拮抗作用，100μg/ml和50gμg/mlTP组对LPS抑制PDLCs增殖活性的拮抗作用不明显。
3.TP与GBE联合应用可使细胞活性明显增强，TP和GBE组对LPS抑制PDLCs增殖活性有拮抗作用，TP能显著抑制LPS介导下PDLCs分泌IL-6、IL-1β、TNF-α的水平。
结论：
1.利用改良组织块培养法成功培养了人PDLCs，为本实验后续实验奠定基础。通过鉴定所培养细胞为来源于中胚层的细胞，而非上皮源性。
2.不同浓度的TP对LPS抑制PDLCs增殖活性的拮抗作用可能不同，低浓度的TP组的拮抗作用不明显，在200μg/ml浓度时拮抗作用较好。
3.TP与GBE联合应用对LPS抑制PDLCs增殖活性有拮抗作用，TP抑制LPS介导PDLCs分泌IL-1β、IL-6、TNF-α。提示TP在抗炎作用方面的作用机制可能与抑制LPS刺激细胞产生IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症细胞因子有关。