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目的:从地黄的根、叶等不同部位分离出的内生真菌中,筛选出可明显增加地黄产量、梓醇及毛蕊花糖苷含量的菌株,并阐明其作用机制,为地黄促生菌肥制备的研究奠定基础。方法:⑴以地黄组培苗和菌株为材料,以鲜重、梓醇及毛蕊花糖苷含量为指标,进行初筛、复筛,初步确定地黄促生真菌,并以L9(34)正交实验筛选最佳促生剂量;⑵通过对菌株激素分泌能力、解磷解钾固氮能力的测定,以及荧光定量法研究菌株对地黄梓醇和毛蕊花糖苷合成过程相关基因表达能力的影响,阐明菌株促生作用机制;⑶采用L9(34)正交实验研究菌肥与复合肥配比对栽培地黄光合作用性能、产量、梓醇及毛蕊花糖苷含量的影响;⑷通过对土壤中氮、磷、钾含量的测定,验证菌株促生作用能力,并以DGGE法研究菌肥对土壤中真菌多样性的影响。结果:1、怀地黄促生真菌的筛选研究从地黄内生真菌中筛选出3株促生真菌,即GG22、GB43、CB25,经鉴定分别为厚垣镰刀菌属、尖孢镰刀菌属、链格孢属。在GG22 0.25m L、GB43 0.25 m L、CB25 0.10 m L的菌液配比下,植株鲜重、梓醇含量、毛蕊花糖苷含量分别为0.3463g/株、4.45%、6.40%,比对照组高出19.67%、52.92%、68.87%。2、怀地黄促生真菌作用机制研究通过对促生真菌激素分泌能力测定发现,菌株GG22、GB43均可分泌赤霉素和吲哚乙酸,而CB25只可分泌赤霉素。对菌株解磷、解钾、固氮能力的测定表明,菌株GG22、GB43可在无氮培养基、解磷培养基及解钾培养基上生长;液体培养中氨态氮、可溶性磷含量以GB43最高,分别为0.3778mg/m L,0.3687mg/m L。可溶性钾含量以混合菌株最高,为21.96ug/m L。荧光定量结果显示,菌株可影响梓醇、毛蕊花糖苷合成过程中相关酶基因的表达,梓醇含量与DXR1、UGT、GGPPS2基因表达量有显著相关性。毛蕊花糖苷含量只与DXR1基因表达量具有显著正相关性,而与DXR3呈显著负相关。3、菌肥在地黄栽培中应用的研究肥料配比对栽培地黄光合性能有一定的影响作用,各处理小区间差异不明显;对于栽培地黄地上和地下部分鲜重、梓醇以及毛蕊花糖苷含量,部分处理较对照组高,且具有显著性差异。收获期数据显示,最佳肥料配比为GG22 25g/2m2、GB4350g/2m2、CB25 5g/2m2、复合肥50g/2m2,可减少58.31%的复合肥施用量。在该配比下,地黄产量、梓醇含量分别增加15.54%、3.40%。4.菌肥对栽培地黄土壤中氮磷钾含量及真菌多样性的影响菌肥与复合肥配合使用可提高不同生长期栽培地黄土壤中全氮、有效磷及速效钾含量,个别施肥处理与对照组相比具有显著差异性,且肥料配比对有效磷含量影响最大,对速效钾作用稍弱。DGGE法证明,菌肥能够影响栽培地黄土壤中菌群结构,增加菌群种类和数量。结论:内生真菌在促进地黄生长,调控地黄次生代谢产物含量方面起到了一定作用。以内生真菌为基础研制的菌肥在地黄栽培应用实验中,提高了地黄产量、梓醇及毛蕊花糖苷含量,减少了复合肥的使用量。本次实验表明,促生菌在中药材规范化种植中具有较大开发价值。