转录介导扩增技术大规模筛查无偿献血者的应用研究

• 作 者: 张立波
• 机 构: 南京大学
• 出 处: 南京大学
• 发表日期: 2013年期
• 关键词: 血液筛查 转录介导扩增技术 临床应用 无偿献血者

背景:经血传播疾病的一个重要途径为输血治疗，血液的安全性具有重大的经济效益和和社会效益。现阶段保障血液安全的主要筛查手段是采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbentassay，ELISA)技术对血液中可能存在的经血传播疾病的病毒抗原或抗体进行检测，以证明献血者携带或感染某些病毒。但是，由于检测技术的限制，造成“窗口期”等情况，输血感染情况还时有发生。因此，迫切需要新的技术手段应用于血液筛查，从而保证血液安全。　　目的:回顾性分析和比较，采用ELISA和核酸扩增技术(Nucleicacid amplification testing，NAT)对南京地域的无偿献血者血液样本，进行人类免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)进行筛查，以此来评估大规模采用病毒核酸检测对降低输血治疗而引发的疾病风险及保障血液安全的作用。　　方法:以南京红十字血液中心2012年5月至2013年9月期间的54，744名无偿献血者做为研究对象，进行静脉取血三管作为样本，分别经EDTA-K2抗凝(ELISA)、促凝剂(ELISA)促凝、EDTA-K2抗凝/分离胶(NAT)，之后分离血浆/血清。(1)使用转录介导扩增技术(TMA)对无偿献血者的血液样本进行HIV RNA，HBV DNA，HCVRNA3项联合核酸检测。(2)同时对上述样本进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测样本中的HIV、HBV和HCV抗原或抗体。(3)对ELISA结果皆为阴性而NAT结果为阳性样本进行HBV、HCV和HIV鉴别试验。(4)经鉴别为HBV DNA阳性献血者再进行“两对半”检测。(5)对NAT阳性而ELISA阴性人群进行一定期限的跟踪随访，重新进行核酸检测及确证试验。　　结果:(1)核酸联检结果54，744名无偿献血者病毒核酸阳性共208份，阳性率为0.38％，其中NAT结果阳性而ELISA结果阴性共75份。(2)酶免检测结果54，744名无偿献血者阳性样本共446份，其中HBsAg阳性率为0.43％(238/54744)、抗HCV阳性率为0.24％(132/54744)、抗HIV/Ag阳性率为0.14(76/54744)，其中ELISA结果阳性而NAT结果阴性共6份。(3)对75份病毒核酸样本进行鉴别试验，其中NAT鉴别结果HBV DNA阳性共45份，未检测到HCVRNA样本，HIV RNA阳性为1份，不确定结果为29份。(4)23位HBV疑似感染者随访追踪结果显示，HBV感染者中存在窗口期患者5例（HBsAg转阳），15位不确定结果献血者追踪显示，只有3例为经鉴别试验检出HBV DNA，其余均为阴性。(5)对HIV感染者追踪显示，第7天患者ELISA结果显示抗HIV抗体及P24抗原出现，均为弱阳性结果，第15天抗HIV抗体结果变强仍然为较弱阳性，但P24抗原显示为强阳性。对15天样本进行确证试验，结果为可疑，但检出GP160及P24条带。　　结论:目前ELISA检测形成的HBV输血残余风险较为显著，而进行大规模核酸检测会有效的缩短无偿献血群体的HIV、HBV和HCV检测的“窗口期”。但是NAT不能完全代替ELISA，血液筛查使用NAT与ELISA互为补充，可十分有效降低输血可能存在的风险。