【摘 要】
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在中国、日本及东南亚等地区,魔芋作为一种传统功能性食品的历史由来已久。魔芋多糖,是从魔芋中提取的一种水溶性的天然高分子多糖,因其含量丰富、可再生、成本低、可生物降解和具有多种生物活性等特征在多个行业得到广泛应用。对比魔芋多糖,魔芋寡糖因其分子量小、水溶性高等特性,更利于被机体吸收和利用,从而具有更为宽泛的生物活性。工业上,甘露聚糖酶是降解魔芋多糖制备魔芋寡糖的有效工具。 为了获得能够高效降解魔芋
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在中国、日本及东南亚等地区,魔芋作为一种传统功能性食品的历史由来已久。魔芋多糖,是从魔芋中提取的一种水溶性的天然高分子多糖,因其含量丰富、可再生、成本低、可生物降解和具有多种生物活性等特征在多个行业得到广泛应用。对比魔芋多糖,魔芋寡糖因其分子量小、水溶性高等特性,更利于被机体吸收和利用,从而具有更为宽泛的生物活性。工业上,甘露聚糖酶是降解魔芋多糖制备魔芋寡糖的有效工具。
为了获得能够高效降解魔芋多糖的菌株,本课题以魔芋多糖为唯一碳源,从腐烂魔芋及魔芋种植区土壤中筛选得到13株能够降解魔芋多糖的菌株。基于对魔芋多糖的降解能力的比较,获得了一株能够高效降解魔芋多糖的菌株DICPB2-5。依据生物信息学的方法,鉴定菌株DICPB2-5为Klebsiellaoxytoca,中文名为产酸克雷伯氏菌。以Klebsiellaoxytoca为研究对象,通过基因工程的手段,从中克隆得到一种甘露聚糖酶基因komanA。通过双酶切的方法将其异源表达至大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中,获得了能够产生甘露聚糖酶KoManA的工程菌株。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析表明,KoManA降解魔芋多糖的主要产物为DP2-9的魔芋寡糖。这些特性表明,KoManA是一种潜在的魔芋寡糖生产工具。
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