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目的:研究中药益坤宁(Yikunning,YKN)对围绝经期大鼠卵巢细胞凋亡率及凋亡相关基因bcl-2,bax和caspase-3表达的影响,探讨益坤宁治疗围绝经期综合征的作用机制。
方法:选用30只自然衰老的围绝经期雌性Wistar大鼠,随机分为3组:益坤宁组、利维爱(Livial)对照组和老年对照组,另选10只青年雌性wistar大鼠作为青年对照组。连续灌胃给药4周后,采用原位脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测大鼠卵巢的细胞凋亡率,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)检测大鼠卵巢中Bcl-2,Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白表达。
结果:益坤宁组大鼠卵巢细胞凋亡率显著低于老年对照组,差异有统计学意义(P<0.01);益坤宁组大鼠卵巢中Caspase-3 mRNA和蛋白表达低于老年对照组,高于青年对照组,差异有统计学意义(P<0.01):益坤宁组大鼠卵巢中Bcl-2、Bax mRNA及其蛋白表达高于老年对照组,差异有统计学意义(P<0.01);益坤宁组大鼠卵巢中Bcl-2/BaxmRNA比值和蛋白比值高于老年对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。
结论:中药益坤宁通过降低大鼠卵巢细胞凋亡率,上调大鼠卵巢中凋亡相关基因bcL-2和bax的表达,上调Bcl-2/Bax mRNA比值和蛋白比值,下调凋亡相关基因caspase-3的表达,从而延缓卵巢衰老,这可能是其治疗围绝经期综合征的分子机制之一。