论文部分内容阅读
目的:使用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导炎症性肠病(IBD)小鼠模型,通过表观形态学和分子生物学技术,测定IL-6、STAT3等表达,初步探讨红萸饮对炎症性肠病的作用机制。 方法:雌性C57BL6小鼠60只,随机分为正常组(n=10)、模型组(n=50);采用2.5%DSS建立炎症性肠病小鼠模型,造模第11天,正常组随机抽取5只和模型组随机抽取10只处死;判断造模成功后,分为正常组(n=5)、模型对照组(n=10)、红萸饮高剂量组(n=10)、红萸饮低剂量组(n=10)和阳性药物对照组(n=10)。造模第11天开始除正常组外,其余各组分别予生理盐水,红萸饮高剂量、低剂量和美沙拉嗪灌胃,每天1次,连续7天,每天记录小鼠体重、便血等变化情况。实验结束后,眼球取血,ELISA检测血清中IL-6表达水平,取结肠组织行HE染色观察形态学变化,Western blotting检测STAT3、p-STAT3蛋白表达,q-PCR测定p53、Survivin、VEGF mRNA表达。 结果:与正常组相比较,模型组小鼠体重下降(20.66±0.77 vs18.47±2.33)(P<0.05),模型组和模型对照组小鼠结肠组织病理和黏膜损伤评分均明显升高[(9.80±1.62 vs0.40±0.52)、(9.10±0.99 vs0.40±0.52),(3.10±1.20 vs0.10±0.32)、(2.40±0.84 vs0.10±0.32)](P<0.01);结肠长度均明显缩短[(5.38±0.36 vs8.47±0.79)、(6.92±0.69 vs8.47±0.79)](P<0.01);与模型组相比较,红萸饮高剂量组、红萸饮低剂量组和阳性药物对照组小鼠体重均无统计学差异,结肠组织病理和黏膜损伤评分均降低[(5.80±2.15 vs9.80±1.62)、(3.40±1.84 vs9.80±1.62)、(4.00±2.11 vs9.80±1.62)](P<0.01),[(2.00±0.82 vs3.10±1.20)、(1.90±0.74 vs3.10±1.20)、(2.00±0.67 vs3.10±1.20)](P<0.05);结肠长度均明显增长[(7.48±0.63 vs5.38±0.36)、(7.63±0.82 vs5.38±0.36)、(7.63±0.54 vs5.38±0.36)](P<0.01)。模型组和模型对照组小鼠血清中IL-6水平明显高于正常组[(320.90±47.16 vs59.76±13.27)、(315.90±51.01 vs59.76±13.27)](P<0.01),红萸饮高剂量组、红萸饮低剂量组和阳性药物对照组表达均显著低于模型组和模型对照组[(84.00±25.43 vs320.90±47.16)、(74.18±18.02 vs320.90±47.16)、(67.82±17.77 vs320.90±47.16)](P<0.01),[(84.00±25.43 vs315.90±51.01)、(74.18±18.02 vs315.90±51.01)、(67.82±17.77 vs315.90±51.01)](P<0.01);模型组和模型对照组小鼠结肠组织中STAT3、p-STAT3蛋白表达明显高于正常组[(3.91±0.71 vs0.98±0.14)、(3.67±0.68 vs0.98±0.14)](P<0.01),[(4.42±0.71 vs1.00±0.13)、(4.07±0.69 vs1.00±0.13)](P<0.01);红萸饮高剂量组、红萸饮低剂量组和阳性药物对照组STAT3、p-STAT3表达均明显低于模型组和模型对照组[(2.01±0.55 vs3.91±0.71)、(1.49±0.39 vs3.91±0.71)、(1.44±0.39 vs3.91±0.71)](P<0.01),[(2.48±0.61 vs3.67±0.68)、(1.75±0.47 vs3.67±0.68)、(1.68±0.43 vs3.67±0.68)](P<0.01);模型组和模型对照组小鼠结肠组织中p53的mRNA表达均明显高于正常组[(3.26±0.99 vs0.98±0.24)、(3.27±0.71 vs0.98±0.24)](P<0.01);红萸饮低剂量组和阳性药物对照组表达均明显低于模型组和模型对照组[(1.53±0.39 vs3.26±0.99)、(1.31±0.53 vs3.26±0.99)](P<0.01),[(1.53±0.39 vs3.27±0.71)、(1.31±0.53 vs3.27±0.71)](P<0.01);模型组和模型对照组小鼠结肠组织中Survivin的mRNA表达低于正常组[(0.69±0.15vs1.11±0.49)、(0.72±0.17 vs1.11±0.49)](P<0.05),其余各组之间无统计学差异;模型组和模型对照组小鼠结肠组织中VEGF的mRNA表达均明显低于正常组[(0.53±0.10 vs0.97±0.18)、(0.57±0.14 vs0.97±0.18)](P<0.01),红萸饮高剂量组、红萸饮低剂量组和阳性药物对照组表达均高于模型组和模型对照组[(0.74±0.09 vs0.53±0.10)、(0.83±0.10 vs0.53±0.10)、(0.90±0.11 vs0.53±0.10)](P<0.05),[(0.74±0.09 vs0.57±0.14)、(0.83±0.10 vs0.57±0.14)、(0.90±0.11 vs0.57±0.14)](P<0.05)。 结论:红萸饮能够改善DSS诱导的IBD模型小鼠结肠大体形态变化和病理损伤情况,降低血清IL-6,结肠组织STAT3、p-STAT3蛋白与p53 mRNA的表达,同时促进VEGF mRNA的表达。