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目的：建立SGC7901细胞(中分化)、经PMA诱导去分化的第10代SGC7901细胞(低分化，简称PMA-SGC7901)两种不同分化程度的人胃癌皮下荷瘤裸鼠模型，在整体动物水平研究PTD4-apoptin蛋白对肿瘤生长的影响，同时研究增强自噬后PTD4-apoptin蛋白抑瘤效应的改变。
方法：PTD4-apoptin蛋白诱导表达及纯化复性后，选取SGC7901、PMA-SGC7901两种细胞进行培养，建立不同分化程度的人胃癌细胞SGC7901皮下荷瘤裸鼠模型，探究PTD4-apoptin(P4A)以及P4A与自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamycin, Rap)联合作用对小鼠移植瘤的影响，建模成功后选取20只肿瘤组织体积和重量相近的裸鼠并随机分成四组，每组各5只，分别为PBS对照组、P4A组、Rap组、P4A+Rap组。在肿瘤组织及周围均匀涂抹PTD4-apoptin蛋白即P4A组；给予PTD4-apoptin蛋白的同时腹腔注射雷帕霉素(Rapamycin,Rap)即P4A+Rap组；单独给予雷帕霉素即Rap组；只涂抹PBS组为空白对照组。皮下接种细胞当天为第0天，每3天记录瘤体长、短径，绘制移植瘤体积-时间生长曲线。给药治疗15天后剥取裸鼠背部的肉瘤，应用免疫组化、Westernblot检测PTD4-apoptin以及PTD4-apoptin蛋白与自噬诱导剂Rap联用对各胃癌组织自噬的影响及Caspase-3、LC3、P62蛋白表达水平的改变。上述实验共重复两次。
结果：①动物实验结果显示，PTD4-apoptin对SGC7901、PMA-SGC7901两种不同分化水平胃癌移植瘤都有明显的抑瘤效应，与P4A组相比，P4A+Rap组的肿瘤抑制作用有所降低。②给药15天后处死裸鼠并剥取肉瘤组织进行免疫组化(IHC)和HE检测，IHC结果显示中分化SGC7901细胞的免疫组化结果趋势和诱导去分化的低分化SGC7901细胞的结果趋势一致，Rap单独作用组、P4A与Rap协同作用组LC3Ⅱ表达水平明显高于PBS组(P＜0.01，**)，P62表达较PBS组减少(P＜0.01，**)；P4A单独作用组和P4A与Rap协同作用组的c-caspase3表达水平明显高于PBS组和Rap组(P＜0.01，**)，P4A与Rap协同作用组c-caspase3的表达较P4A单独作用组下降(P＜0.01，**)。③提取肿瘤组织蛋白并进行Westernblot检测，结果显示LC3Ⅱ蛋白表达量Rap组和P4A+Rap组较PBS组增加，P62表达较PBS组减少；P4A+Rap组c-caspase3的表达较P4A组下降。
结论：①PTD4-apoptin能明显抑制中、低分化SGC7901胃癌细胞裸鼠移植瘤的生长。②与中分化SGC7901移植瘤实验组相比，PTD4-apoptin对低分化SGC7901移植瘤实验组有更明显的抑瘤效应。③自噬诱导剂Rap和PTD4-apoptin联合给药较PTD4-apoptin单独给药，SGC7901细胞移植瘤的抑瘤效果有所降低，表明增强SGC7901细胞的自噬水平减弱了PTD4-apoptin的体内抑瘤效应。
方法：PTD4-apoptin蛋白诱导表达及纯化复性后，选取SGC7901、PMA-SGC7901两种细胞进行培养，建立不同分化程度的人胃癌细胞SGC7901皮下荷瘤裸鼠模型，探究PTD4-apoptin(P4A)以及P4A与自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamycin, Rap)联合作用对小鼠移植瘤的影响，建模成功后选取20只肿瘤组织体积和重量相近的裸鼠并随机分成四组，每组各5只，分别为PBS对照组、P4A组、Rap组、P4A+Rap组。在肿瘤组织及周围均匀涂抹PTD4-apoptin蛋白即P4A组；给予PTD4-apoptin蛋白的同时腹腔注射雷帕霉素(Rapamycin,Rap)即P4A+Rap组；单独给予雷帕霉素即Rap组；只涂抹PBS组为空白对照组。皮下接种细胞当天为第0天，每3天记录瘤体长、短径，绘制移植瘤体积-时间生长曲线。给药治疗15天后剥取裸鼠背部的肉瘤，应用免疫组化、Westernblot检测PTD4-apoptin以及PTD4-apoptin蛋白与自噬诱导剂Rap联用对各胃癌组织自噬的影响及Caspase-3、LC3、P62蛋白表达水平的改变。上述实验共重复两次。
结果：①动物实验结果显示，PTD4-apoptin对SGC7901、PMA-SGC7901两种不同分化水平胃癌移植瘤都有明显的抑瘤效应，与P4A组相比，P4A+Rap组的肿瘤抑制作用有所降低。②给药15天后处死裸鼠并剥取肉瘤组织进行免疫组化(IHC)和HE检测，IHC结果显示中分化SGC7901细胞的免疫组化结果趋势和诱导去分化的低分化SGC7901细胞的结果趋势一致，Rap单独作用组、P4A与Rap协同作用组LC3Ⅱ表达水平明显高于PBS组(P＜0.01，**)，P62表达较PBS组减少(P＜0.01，**)；P4A单独作用组和P4A与Rap协同作用组的c-caspase3表达水平明显高于PBS组和Rap组(P＜0.01，**)，P4A与Rap协同作用组c-caspase3的表达较P4A单独作用组下降(P＜0.01，**)。③提取肿瘤组织蛋白并进行Westernblot检测，结果显示LC3Ⅱ蛋白表达量Rap组和P4A+Rap组较PBS组增加，P62表达较PBS组减少；P4A+Rap组c-caspase3的表达较P4A组下降。
结论：①PTD4-apoptin能明显抑制中、低分化SGC7901胃癌细胞裸鼠移植瘤的生长。②与中分化SGC7901移植瘤实验组相比，PTD4-apoptin对低分化SGC7901移植瘤实验组有更明显的抑瘤效应。③自噬诱导剂Rap和PTD4-apoptin联合给药较PTD4-apoptin单独给药，SGC7901细胞移植瘤的抑瘤效果有所降低，表明增强SGC7901细胞的自噬水平减弱了PTD4-apoptin的体内抑瘤效应。