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中药肉桂为樟科常绿乔木植物肉桂(Cinnamomun cassia Presl)的树皮。具有补火助阳,散寒止痛,温经通脉的功效。肉桂中含有挥发油,油中主要成分为桂皮醛、桂皮酸、乙酸桂皮酯等。挥发油类化合物具有抗溃疡、镇静、镇痛、抗惊厥、解热、抗菌等作用。以往对肉桂化学和药理的研究主要集中在脂溶性部位和桂皮醛成分,但对其它部位的研究极少。目前对肉桂多酚类成分的免疫抑制活性及抗炎作用尚未有研究报道。
首先我们在体外筛选出肉桂多酚提取物具有免疫抑制活性,结果显示肉桂多酚提取物对丝裂原(ConA和LPS)诱导的脾淋巴细胞增殖有显著的抑制作用;通过进一步研究发现在抗CD3淋巴细胞的增殖反应中,肉桂多酚提取物也能浓度依赖的抑制淋巴细胞的增殖。在初步确认肉桂多酚提取物可能具有较好的免疫抑制活性后,我们对淋巴细胞培养上清中细胞因子的产生进行了检测,结果发现肉桂多酚提取物对IFN-γ和IL-17产生的抑制作用最为显著,接下来探讨了影响IFN-γ和IL-17产生的作用机制可能是通过抑制p38、ERK的磷酸化水平从而抑制IFN-γ和IL-17的产生。
在接下来的体内实验中,我们通过动物模型进一步验证肉桂多酚提取物在体内的免疫抑制作用。首先在迟发型超敏反应中,口服肉桂多酚提取物能显著抑制DTH小鼠耳肿胀水平并对淋巴细胞的增殖及细胞因子IFN-γ和IL-2的产生均有显著抑制作用;在牛Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎中,肉桂多酚提取物对足肿胀程度有一定的抑制趋势;并对腹腔巨噬细胞株Raw264.7产生的NO有显著的抑制作用。这些结果表明,肉桂多酚提取物具有明显的免疫抑制活性,为肉桂化合物进一步开发和利用提供了研究基础,其作用机制值得进一步的研究讨论。
蟾酥一词源于《本草衍义》属名贵中药,为蟾蜍科动物中华大蟾蜍或黑眶蟾蜍等的耳后腺及皮肤腺分泌的白色浆液,经加工干燥制成,性味甘辛、温、有毒,近年研究证明,蟾酥不仅可以镇痛、消炎、麻醉,还有抗癌、抗辐射、强心等多种生物活性。蟾酥化学成分复杂,主要有强心甾类、吲哚碱类、甾醇类以及肾上腺素、多糖、蛋白质、氨基酸和有机酸等。本课题采用蟾酥经氯仿回流提取得到的一系列强心甾类化合物。强心甾类具有免疫调节和抗肿瘤等多种药理作用。
我们选用了5种蟾酥提取物,在体外进行抗肿瘤作用研究,发现蟾酥提取物有明显的抗肿瘤功效,对人胰腺癌细胞和人宫颈癌细胞均有显著的抑制作用。其作用机制可能与蟾酥诱导细胞凋亡有关。接下来我们选取了两种蟾酥提取物在体外评价了蟾酥的免疫调节活性,发现其在低浓度下具有促进淋巴细胞增殖的作用,而高浓度又能抑制淋巴细胞增殖。随着培养时间延长,这种现象随之消失。通过查阅文献,对其这一现象进行了分析。可能是由于蟾酥提取物能一过性的导致细胞内钙离子浓度升高, Ca2+作为第二信使,在细胞的分裂、分化及凋亡中发挥重要的作用。而随着培养时间延长细胞内钙离子浓度降低,因此,对细胞增殖的影响消失。但其明确的作用机制有待于进一步研究。