【摘 要】
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目的:本文通过对大鼠原代皮质神经元的体外培养,探讨GAP-43在P53作用下的表达变化。 方法:1.取新生24小时内的Wistar大鼠,在细胞间超净台内无菌条件下通过分离其双侧皮质,进行原代皮质神经元的培养。2.提取大鼠原代皮质神经元,对皮质神经元细胞进行免疫荧光染色并置于倒置荧光显微镜下观察,对观察到的细胞进行拍照。3.通过对大鼠原代皮质神经元的体外培养,应用Real-time PCR技术检测
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目的:本文通过对大鼠原代皮质神经元的体外培养,探讨GAP-43在P53作用下的表达变化。
方法:1.取新生24小时内的Wistar大鼠,在细胞间超净台内无菌条件下通过分离其双侧皮质,进行原代皮质神经元的培养。2.提取大鼠原代皮质神经元,对皮质神经元细胞进行免疫荧光染色并置于倒置荧光显微镜下观察,对观察到的细胞进行拍照。3.通过对大鼠原代皮质神经元的体外培养,应用Real-time PCR技术检测GAP-43mRNA在P53作用下表达含量的变化。
结果:1.体外成功建立大鼠原代皮质神经元培养体系。2.GAP-43在大鼠皮质神经元中的表达:大鼠原代皮质神经元中,免疫荧光可以观察到细胞核、细胞质、细胞膜中GAP-43的表达。3.通过P53的慢病毒转染使P53高表达,大鼠原代皮质神经元中GAP-43mRNA的表达含量增高。4.加入P53抑制剂可以诱导大鼠原代皮质神经元中GAP-43mRNA的表达含量下降。
结论:1.成功建立体外大鼠原代皮质神经元的培养体系。2.大鼠原代皮质神经元细胞中的细胞膜、轴突表达GAP-43。3.大鼠原代皮质神经元中在转录水平上P53与GAP-43具有相关性。
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