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本研究以奥尼罗非鱼鱼皮为原料，采用酶法降解制备酶解液。研究了酶解液的功能特性，并通过体外细胞实验观察酶解液对骨髓基质细胞及成骨细胞的影响。
本文主要工作及结果如下：
1．对奥尼罗非鱼鱼皮的一般成分进行了分析，其水分含量为69.83％，蛋白质为27.22％，灰分为0.21％，粗脂肪为2.55％，总糖为0.19％。
2．使用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶对奥尼罗非鱼鱼皮进行酶解，探讨了酶解的单因素条件。在单因素条件的基础上，进行双酶酶解，并对单酶酶解和双酶酶解进行了比较。木瓜蛋白酶的单因素优化条件：酶解温度为55℃，酶用量为2000IU/g原料，酶解3h。胰蛋白酶的单因素优化条件：酶解温度为47℃，酶用量为2000IU/g原料，酶解3h。双酶酶解优于单酶酶解；其中木瓜蛋白酶加胰蛋白酶双酶酶解液的氨基态氮为0.0664mol·L<-1>，蛋白质回收率为80.75％，是各组中最高的，被选定用于后续实验。
3．使用氨基酸自动分析仪对木瓜蛋白酶加胰蛋白酶双酶酶解液的氨基酸组成进行了分析，并研究了这种酶解液的保水性，乳化性，乳化稳定性，起泡性及泡沫稳定性。酶解液中甘氨酸含量最高(23.77％)，胱氨酸含量最低(0.61％)；必需氨基酸中，赖氨酸最高(4.03％)，异亮氨酸最低(1.82％)。酶解液的保水性随浓度的升高而增强，酶解原液的保水性弱于同浓度的甘油溶液。酶解液的起泡性与同浓度的酪蛋白溶液相似，但乳化性、乳化稳定性、泡沫稳定性弱于同浓度的酪蛋白溶液。
4．采用MTT法和PNPP法观察酶解液对骨髓基质细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响。酶解液在浓度为5×10<-6>mol·L<-1>时，可以促进骨髓基质细胞的增殖(P<0.05)，在浓度为5×10<-6> mol·L<-1>和5×10<-7>mol·L<-1>时，可以增强骨髓基质细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05)。酶解液和成骨诱导液共同使用时，对细胞增殖和碱性磷酸酶活性没有显著影响。
5．分别采用MTT法，PNPP法，原子吸收法，放射免疫法和茜素红染色法观察酶解液对成骨细胞的增殖能力、碱性磷酸酶活性、钙含量，骨钙素分泌量及矿化能力的影响。酶解液在浓度5×10<-5>mol·L<-1>，5×10<-6>mol·L<-1>，5×10<-7>mol·L<-1>时可增强成骨细胞的增殖能力(P<0.05)；浓度为5×10<-6>mol·L<-1>，5×10<-7>mol·L<-1>时可增强成骨细胞碱性磷酸酶活性(P<0.05)；浓度为5×10<-6>mol·L<-1>，5×10<-7>mol·L<-1>，5×10<-8>mol·L<-1>时可增加细胞中钙的含量和骨钙素的分泌量，加强成骨细胞的矿化能力(P<0.05)。
6．对酶解液进行超滤，观察不同级分对成骨细胞的影响。收集超滤级分ONSEHUF-1(分子量在10KD以下)和级分ONSEH UF-2(分子量3KD以下)。ONSEH UF-1和ONSEH UF-2在浓度5×10<-6>mol·L<-1>，5×10<-7>mol·L<-1>，5×10<-8>mol·L<-1>时可以提高成骨细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素的分泌量(P<0.05)。