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目的:建立晚期肺癌的动物模型,研究其对药物的治疗反应状况,寻找适合评价以控制症状、改善生活质量为目的疗法的实验模型。
方法:全部采用清洁级C57BL/6近交系小鼠。(1)模型建立:在C57BL/6小鼠的腋后线第6肋间胸腔或小鼠腋部皮下,分别种植鼠源性Lewis肺癌细胞0.2ml(5×106/ml)。(2)生存时间观察:两组小鼠胸腔和皮下造模后不用药物处理,观察其生存时间。(3)分组处理:胸腔造模和皮下造模后两组小鼠分别随机分为5-FU组、顺铂组、健择组、中药组、对照组,每组20只。5-FU组、顺铂(DDP)组、健择(GEM)组分别于第6天、第11天腹腔注射相应药物稀释液0.2ml各一次。中药组于造模后第6天开始,连续7天每日灌服中药浓缩液0.2ml。对照组腹腔注射生理盐水0.2ml。(4)生存状态观察:小鼠体重,饲料消耗量,游泳试验,常压耐缺氧试验,大体观察胸腔、纵隔、胸水等浸润和转移情况。(5)免疫组织化学法检测肿瘤组织内增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)表达。
结果:(1)生存时间未采取药物治疗的胸腔组小鼠中位数生存时间13.5(8-18)天,未采取药物治疗的皮下组小鼠中位数生存时间45(25-71)天。胸腔组的生存期范围离散程度较皮下组小(P<0.05)。
(2)生活状态病程中胸腔组小鼠体重下降、摄食减少等恶病质体征较皮下组明显,胸腔组小鼠活动减少、睡眠时间缩短、蜷曲、毛发脱落等现象较皮下组多见。
①体重胸腔组较相应皮下组体重下降明显。通过药物治疗后,胸腔组内的中药组、顺铂组和健择组体重下降程度较对照组和5-FU组体重下降程度低(P<0.05)。皮下组内各小组体重变化无明显差异。
②饲料消耗胸腔组较相应皮下组饲料消耗量少。胸腔组内的对照组和5-FU组饲料消耗量较其他组明显减少(P<0.05),中药组、顺铂组和健择组间无明显差异。皮下组内各小组饲料消耗量无明显差异。
③游泳实验及耐缺氧实验胸腔组较相应皮下组实验时间缩短。胸腔组内对照组和5-FU组实验时间较其他组明显缩短(P<0.05),中药组、顺铂组和健择组间无明显差异。皮下组内各小组实验时间无明显差异。
④大体观察胸腔组小鼠可出现胸水和肿瘤转移,如纵隔、心包、肝转移等。皮下组未见肿瘤转移。
(3)免疫组化对照组和5-FU组中PCNA、VEGF、EGF、EGFR阳性细胞数较其他组明显增多(P<0.05),中药组PCNA、VEGF、EGF、EGFR阳性细胞数较顺铂组和健择组明显增多(P<0.05)。
结论:(1)胸腔移植模型可作为晚期肺癌动物模型。
(2)胸腔移植模型较皮下移植模型能更好地反映药物的作用。胸腔移植模型的生活状态可较好地反映药物的作用。
(3)化疗药物、中药对PCNA、VEGF、EGR、EGFR等的表达有不同程度的抑制作用。
(4)中药对抑制肿瘤发展优势不明显,但对改善模型生存时间、生活状态有较好的作用。